丁酸钠对CHO细胞生长及rhEPO表达量的影响

目的优化丁酸钠的添加浓度提高rhEPO表达量。方法设0、0.25、0.5、0.75mM丁酸钠添加浓度,24孔板培养,隔天换液,细胞计数并收集上清检测rhEPO表达量及糖耗速率,检测20天。比较单位细胞表达量、总表达量的变化及糖耗速率,选择合适的丁酸钠添加浓度。结果丁酸钠浓度越高对细胞抑制作用越强,但对单位细胞总表达量提高越多。平衡这两种作用,0.25mM和0.5mM丁酸钠为较优选择,20天内rhEPO总表达量的提高分别提高了36.1%、25.5%,而且随着培养时间的延长可以提高得更多。结论添加低浓度的丁酸钠可以提高rhEPO总表达量,建议在发酵中后期,添加0.25mM的NaBu,可以稳定并提高rhEPO的表达量,进而延长整个发酵周期。