成纤维细胞生长因子2和丹参酮ⅡA在大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化中的作用

目的 探讨成纤维细胞生长因子2（FGF-2）和丹参酮ⅡA（tanshinoneⅡA）在大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）向心肌样细胞分化中的作用。 方法 体外分离、培养BMSCs，利用流式细胞术进行鉴定。实验分组：对照组（不加任何诱导剂）、FGF-2组、丹参酮ⅡA组及两者联合诱导组。MTT检测诱导后的活性及增殖情况；Real-time PCR检测早期心肌转录因子GATA-4、Nkx2.5的表达；免疫细胞化学染色法检测缝隙连接蛋白43(Cx43)以及心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnI）的表达；免疫荧光化学染色法检测结蛋白(desmin)、原肌球蛋白（Tm）的表达；Western blotting检测结蛋白、Tm的表达。 结果 各诱导组较对照组增殖明显。与对照组相比，诱导组GATA-4和Nkx2.5基因的表达增强，联合组表达量最高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。联合诱导组各标记物Cx43、cTnI、结蛋白、Tm的阳性表达率高于FGF-2及丹参酮ⅡA单独诱导组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。Western blotting结果显示，联合诱导组结蛋白、Tm的表达量明显高于其他实验组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。透射电子显微镜结果显示，诱导后细胞的细胞核居中，细胞质中可见肌丝、粗面内质网、线粒体和核糖体。 结论 FGF-2和丹参酮ⅡA均能促进BMSCs增殖，诱导BMSCs分化为心肌样细胞，两者联合诱导的效果较其他组更佳。