| 红细胞膜相关蛋白通过IL-6/STAT3/ROR-γt信号通路抑制小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎中Th17细胞分化 |
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| 作者姓名： | 何可可 李远迪 文廷浩 朱婕 高杰 胡蓉 韩锋 苏敏 |
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| 作者单位： | 1.贵州医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室,贵阳 550025;2.贵州医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室,贵阳 550025;贵州医科大学转化医学研究中心,贵阳 550025;3.贵州医科大学附属医院神经外科,贵阳 550004;4.贵州医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室,贵阳 550025;贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室,贵州省再生医学重点实验室,中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室,贵阳 550025 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(82171343,82160151);;贵州省科技计划项目(黔科合支撑[2020]4Y230号);;贵州省国际科技合作项目(黔科合平台人才[2020]4103号); |
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| 摘 要： | 目的 探讨小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型中,外源性和内源性红细胞膜相关蛋白(ERMAP)通过白细胞介素6/信号转录及转录激活因子3(IL-6/STAT3)/维甲酸相关孤核受体γt/(ROR-γt)信号通路对辅助性T细胞17(Th17)细胞分化的影响.方法 流式细胞术验证不同浓度ERMAP-Ig融合蛋白功能;琼脂糖凝胶电泳鉴定ERMAP基因敲除小鼠.流式细胞术检测ERMAP-Ig融合蛋白在体外对Th17细胞分化影响.40只6周龄普通C57BL/6小鼠随机分为2组建立EAE模型:对照(control)-Ig和ERMAP-Ig组,每组20只;记录临床评分;流式细胞术检测EAE小鼠体内Th17细胞分化情况.40只6周龄已鉴定的野生型和ERMAP基因敲除小鼠分为2组建立EAE模型:ERMAP+/+和ERMAP-/-组,每组20只.记录临床评分;脊髓HE和固蓝(LFB)染色并进行组织学半定量评分.流式细胞术检测IL-17A+CD4+T细胞百分比;Western blotting检测IL-6、白细胞介素17(IL-17)、STAT3、磷酸化 STAT3(p-STAT3)、ROR-γt 蛋白水平表达;Real-time PCR 检测 IL-17、肿瘤坏死因子 a(TNF-a)、IL-6、STAT3和ROR-γt的mRNA表达;ELISA检测细胞水平IL-17和TNF-a的表达.结果 1.外源性ERMAP-Ig融合蛋白抑制体内外Th17细胞分化且减轻小鼠EAE症状.2.与对照组相比,ERMAP-/-组EAE小鼠炎性浸润和脱髓鞘症状加重,Th17分泌IL-17A增加.3.内源性ERMAP基因敲除后,IL-17、TNF-α、IL-6、STAT3及ROR-γt表达均增加.差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 ERMAP可能通过IL-6/STAT3/ROR-γt信号通路调控Thl7细胞分化,参与小鼠EAE发生发展.
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| 关 键 词： | 红细胞膜相关蛋白 实验性自身免疫性脑脊髓炎 辅助性T细胞17 白细胞介素-6 信号转录及转录激活因子3 维甲酸受体相关孤核受体γt 流式细胞术 小鼠 |
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