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| 胶质瘤相关基因Tob的功能研究 | |
| 引用本文： | 孙继勇,王爱东,黄强. 胶质瘤相关基因Tob的功能研究[J]. 中华神经医学杂志, 2005, 4(11): 1081-1084 |
| 作者姓名： | 孙继勇 王爱东 黄强 |
| 作者单位： | 1. 214002,无锡,南京医科大学附属无锡市第二人民医院 2. 215004 苏州,苏州大学附属第二医院 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金（30070772） |
| 摘 要： | 目的研究Tob基因在胶质瘤细胞系SHG-44中的功能,为下一步进行试验性治疗提供依据.方法按照Tob基因的GenBank登录号D38305,构建带有绿色荧光蛋白（GFP）和新型抗生素Zeocin抗性基因的pTracer-EF/V5-His A表达载体.利用脂质体将上述表达质粒转入SHG44胶质瘤细胞.在各个不同的培养时段选择2、4、8、16、24、36、48 h分别在倒置显微镜下观察,最后在48 h时取未转染和转染的细胞大约105个作细胞涂片,进行荧光显微镜摄影和GFAP免疫组化染色分析.同时作体外生长曲线和细胞周期的流式细胞术分析.结果酶切鉴定和序列分析均证实Tob基因被成功克隆,将此基因成功转染到SHG-44细胞后,荧光显微镜观察可见用4μg脂质体和2μg DNA,最后用10μg/mLZeocin筛选可以达到90%的阳性细胞数.在转染Tob基因成功的细胞中GFAP染色的阳性率也同样升高.细胞在转染了Tob基因以后生长速度明显变慢,几乎处于停滞状态.流式细胞术分析显示在体外培养24 h后转染阳性细胞G2/M期比例明显减少,而凋亡细胞比例也出现明显的升高.结论Tob基因转染后的胶质瘤细胞生长受到明显抑制,出现向正常胶质细胞的分化和凋亡现象,提示Tob基因确实是一胶质瘤细胞增殖抑制基因,值得进一步做功能研究和实验性基因治疗研究. |
| 关 键 词： | 神经胶质瘤 功能研究 Tob基因 |
| 文章编号： | 1671-8925（2005）11-1081-004 |
| 收稿时间： | 2005-04-22 |
| 修稿时间： | 2005-04-22 |
Functional study of Tob gene related to Glioma |
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| SUN Ji-yong,WANG Ai-dong,HUANG Qiang. Functional study of Tob gene related to Glioma[J]. Chinese Journal of Neuromedicine, 2005, 4(11): 1081-1084 | |
| Authors: | SUN Ji-yong WANG Ai-dong HUANG Qiang |
| Abstract: | |
| Keywords: | Glioma Functional analysis Tob gene |
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