重组人IL-18的基因克隆与表达的研究 |
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作者姓名: | 李胜 樊立 李占元 衣龙海 马道新 刘洁 |
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作者单位: | [1]山东大学齐鲁医院,山东济南250014 [2]中国农业大学遗传室,北京100049 [3]山东大学齐鲁医院普外科,山东济南250014 [4]山东省肿瘤防治研究院肝胆外科,山东济南250117 [5]山东省肿瘤防治研究院图书馆,山东济南250117 |
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摘 要: | 目的:利用基因重组技术构建人IL-18(rhIL-18)的真核表达载体,并在大肠杆菌中表达。方法:利用RT-PCR技术从外周血细胞扩增得到IL-18的cDNA并测定其核酸序列。将扩增产物酶切后克隆到pORF5质粒的Nco Ⅰ/Nhe Ⅰ 酶切位点,转化大肠杆菌JM109,筛选阳性重组子,构建真核表达质粒pORF5-hIL-18。结果:真核表达质粒pORF5-hIL-18在大肠杆菌JM109表达,能够诱导PBMC合成GMCSF,具有协同rhIL-2增强NK细胞细胞毒作用的能力。结论:重组表达的rhIL-18具有生物活性,可用于进一步的功能研究。
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关 键 词: | 白细胞介素18 基因序列 基因表达 基因重组 IL-18 基因克隆 大肠杆菌 |
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