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| 兔抗人Rig-I蛋白N端CARD结构域多克隆抗体的制备与鉴定 | |
| 引用本文： | 陈磊,李咸洋,奚绪光. 兔抗人Rig-I蛋白N端CARD结构域多克隆抗体的制备与鉴定[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2009, 25(12) |
| 作者姓名： | 陈磊 李咸洋 奚绪光 |
| 作者单位： | 1. 西北农林科技大学生命科学学院,陕西,杨凌,712100;上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所,上海,200025 2. 上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所,上海,200025 3. 西北农林科技大学生命科学学院,陕西,杨凌,712100 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目 |
| 摘 要： | 目的:制备人维甲酸诱导基因I(hRig-I)N端CARD结构域(hRig-I-N)多克隆抗体.方法:从逆转录病毒载体MigRI-hRig-I中扩增hRig-I基因N端CARD结构域852 bp长度的基因片段,克隆入pGEX-4T3中,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下,表达GST-hRig-I-N融合蛋白,将表达的融合蛋白纯化,免疫家兔制备抗体,并以间接ELISA法测定抗体效价,以Western blot、细胞免疫荧光方法鉴定抗体的特异性.结果:在大肠杆菌中成功表达融合蛋白GST-hRig-I-N,ELISA法检测抗体的效价达到1:125 000,Western blot及细胞免疫荧光检测结果显示抗体可与原核及真核表达的hRig-I-N蛋白特异结合.结论:制备了高效价、高特异性的hRig-I-N抗体,为进一步研究hRig-I-N的功能奠定了基础. |
| 关 键 词： | 原核表达 抗体制备 |
Preparation and characterization of rabbit polyclonal antibody against the N terminal CARD domain of human Rig-I |
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| Abstract: | |
| Keywords: | hRig-I |
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