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小鼠PKD1基因的克隆及打靶载体的构建
作者姓名:郁胜强  胡以平  梅长林
作者单位:第二军医大学长征医院肾内科,上海,200003;第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室
基金项目:国家“863”计划部分资助,全军“八五”医药科研规划基金,上海市卫生系统百人计划资助
摘    要:目的:克隆小鼠的多囊肾病1(PKD1)基因,构建PKD1基因的Knockout载体,为产生PKD1基因缺陷小鼠品系准备条件。方法;以正常小鼠基因组DNA为模板,扩增小鼠PKD1基因部分序列为探针,应用噬斑原位杂交技术筛选129SvTer小鼠基因组DNA库,并应用Southern杂交,亚克隆及测序等方法鉴定所得克隆。对克隆到的PKD1基因组DNA片段进行结构分析,选择合适的亚克隆片段,以pTK-N

关 键 词:基因  PKD1  基因克隆  载体构建
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