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转染杜氏盐藻14-3-3基因对食管鳞癌EC9706细胞Bcl-2和Caspase-9蛋白表达的影响
引用本文:魏攀,李杰,王莉莉,许培荣,薛乐勋. 转染杜氏盐藻14-3-3基因对食管鳞癌EC9706细胞Bcl-2和Caspase-9蛋白表达的影响[J]. 郑州大学学报(医学版), 2010, 45(1)
作者姓名:魏攀  李杰  王莉莉  许培荣  薛乐勋
作者单位:郑州大学生物系细胞生物学研究室,郑州,450001;郑州大学生物系细胞生物学研究室,郑州,450001;郑州大学生物系细胞生物学研究室,郑州,450001;郑州大学生物系细胞生物学研究室,郑州,450001;郑州大学生物系细胞生物学研究室,郑州,450001
基金项目:国家自然科学基金资助项目30700014;;科技部国际科技合作基金资助项目2007DFA01240
摘    要:目的:探讨转染杜氏盐藻14-3-3基因对食管鳞癌EC9709细胞Bcl-2和Caspase-9蛋白表达的影响.方法:将杜氏盐藻14-3-3基因cDNA序列分别亚克隆入表达载体pEGFP-C1和pcDNA3.1(+)的Hind Ⅲ和Bam H Ⅰ位点,构建真核表达载体pEGFP-C1-14-3-3和pcDNA3.1(+)-14-3-3,采用脂质体方法转染EC9706细胞,同时设立空载体对照和空白对照,荧光显微镜观察pEGFP-14-3-3融合蛋白在EC9709细胞中的定位;G-418筛选稳定转染pcD-NA3.1(+)-14-3-3的细胞株,采用RT-PCR和Western blotting法检测14-3-3基因的表达;Western blotting检测3种细胞中Bcl-2和Caspase-9蛋白的表达.结果:pEGFP-14-3-3融合蛋白定位于EC9706细胞的细胞核;通过G-418筛选,最终获得稳定表达盐藻14-3-3基因的转染细胞株;与转染空载体和空白对照的EC9706细胞相比,转染pcDNA3.1(+)-14-3-3的EC9706细胞中Bcl-2蛋白表达量明显增高[(1.60±0.20)、(0.90±0.15)和(2.40±0.10);F=69.889 7,P<0.001],而Caspase-9蛋白表达量明显降低[(1.00±0.04)、(1.40±0.08)和(0.40±0.05);F=217.066 7,P<0.001].结论:杜氏盐藻14-3-3基因可能在EC9706细胞凋亡过程中发挥了抑制作用.

关 键 词:杜氏盐藻  14-3-3基因  食管鳞癌  Bcl-2  Caspase-9

Expression of Bcl-2 and Caspase-9 proteins of EC9706 cell transfected 14-3-3 gene of Dunaliella salina
WEI Pan , LI Jie , WANG Lili , XU Peirong , XUE Lexun. Expression of Bcl-2 and Caspase-9 proteins of EC9706 cell transfected 14-3-3 gene of Dunaliella salina[J]. Journal of Zhengzhou University: Med Sci, 2010, 45(1)
Authors:WEI Pan    LI Jie    WANG Lili    XU Peirong    XUE Lexun
Affiliation:WEI Pan,LI Jie,WANG Lili,XU Peirong,XUE LexunLaboratory for Cell Biology,Department of Biology,Zhengzhou University,Zhengzhou 450001
Abstract:
Keywords:Dunaliella salina  14-3-3 gene  esophageal squamous cell cancer  Bcl-2  Caspase-9  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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