逆转录病毒介导的HyTK基因转移及杀伤恶性黑色素瘤细胞的研究 |
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作者姓名: | 吴小兵 苏成芝 伍志坚 赵健 彭朝晖 |
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作者单位: | 第四军医大学生物化学教研室,第一军医大学分子生物学研究所 |
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摘 要: | 用逆转录病毒载体将单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSVtk)基因导人恶性肿瘤细胞,随后应用药物丙氧鸟苷(GCV)可选择性地杀死肿瘤细胞.本研究中我们将HyTK基因克隆到逆转录病毒载体LXSN中,并切除其中的SV40早期启动子,构建成重组逆转录病毒载体LHyTK/N,并用该重组病毒转染小鼠恶性黑色素瘤细胞系B16细胞,经PCR方法检测证明HyTK基因已成功地导入肿瘤细胞中,且不含可复制的辅助病毒.分别用不同浓度的GCV作用于HyTK-及HyTK+的B16细胞,48h后,在光镜下观察细胞形态及进行活细胞计数.结果表明,GCV浓度大于0.1μmol/L即对B16/HyTK+细胞有显著的杀伤作用
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关 键 词: | 黑色素瘤 细胞 基因转移 胸苷激酶基因 逆转录病毒 载体 |
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