转化生长因子β1／整合素连接激酶信号通路在大鼠肾小管上皮细胞转分化中的作用及大黄素对其的干预效应

目的：研究转化生长因子β1整合素连接激酶（transforming growth factor-betal／integrin-linked kinase，TGF-β1／ILK）信号通路在白细胞介素β1（interleukin-1β，IL-1β）诱导的大鼠肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化（tubular epithelial-myofibroblast transdifferentiation，TEMT）中的作用，并探讨大黄素是否是通过抑制TGF-β1/ILK信号通路而影响TEMT。方法：以雄外培养的正常大鼠肾小管上皮细胞株（NRK52E）为研究对象，分为空白对照组、大黄素对照组、IL-1β诱导组、大黄素阻断组、TGF-β1Ⅰ型受体阻断剂（SB431542）阻断组、大黄素和SB431542共同阻断组、大黄素预处理组和大黄素逆转组。NRK52E细胞在上述处理因素下培养48h后，在倒置相差显微镜下观察细胞形态变化；免疫组化双标法检测细胞表型标志物α平滑肌肌动蛋白（alpha-smooth muscle actin，α-SMA）和E-钙黏连素（E-cadherin）的表达；免疫组化单染法检测NRK52E细胞TGF-β1和ILK的表达，采用图像分析软件定量分析免疫组化染色结果；酶联免疫吸附测定法测定NRK52E细胞分泌的纤维连接蛋白（fibronectin，FN）含量。结果：与空白对照组比较，IL-1β诱导TEMT的同时TGF-β1和ILK表达增加（P〈0．05），大黄素可明显抑制IL-1β诱导的上述变化（P〈0．05）。阻断TGF-β1信号通路后，IL-1β诱导的TEMT明显受抑，且ILK表达减少。与大黄素阻断剂组比较，大黄素预处理不能预防IL-1β诱导的TEMT，大黄素不能逆转IL-1β诱导的TEMT。相关分析显示，TGF-β1表达与α-SMA、FN、ILK表达呈正相关，与E-钙黏连素表达呈负相关。ILK表达与α-SMA、FN表达呈正相关，与E-钙黏连素表达呈负相关。结论：1L-1β通过激活TGF-β1／ILK信号通路蛋白而诱导TEMT，大黄素通过抑制TGF-β1／ILK信号通路蛋白而抑制IL-1β诱导TEMT。