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| 特殊结构双靶点CAR-T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用 | |
| 作者姓名： | 刘灿 彭浩 曾伟杰 李薇 陈可可 李琬婷 曾桂芳 梁晓 胡隽源 周明 |
| 作者单位： | 1. 湖南省人民医院(湖南师范大学附属第一医院)血液内科;2. 深圳市北科生物科技有限公司 |
| 摘 要： | 目的:探索并设计一种新颖的双靶点嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor, CAR)结构,获得相应CAR-T细胞并验证其对肿瘤细胞的体内外杀伤效果。方法:构建并制备5种包含人源化CD19 scFv和CD79b scFv、CD8 hinge&TM-4-1BB-CD3ζ和/或CD3ε链胞内区的双靶点CAR-T细胞,荧光素酶法和ELISA法检测CAR-T细胞对3M-CD19-CD79b-Luc靶细胞的杀伤能力和细胞因子的分泌,选取最优结构CAR-T细胞治疗Daudi-Luc细胞构建的白血病小鼠模型并评估其疗效,同时使用其他靶点代入优选结构,相同方法验证该结构的稳定性及有效性。结果:CAR-19-79b-T细胞培养7 d后,CAR-19表达率为21.6%-36.3%,CAR-79b表达率为21.7%-37.8%。CAR-19-79b-T细胞在10∶1效靶比时,对3M-CD19-CD79b-Luc细胞的杀伤率均显著高于T细胞对照组,其中CARⅢ、CARⅣ号结构细胞杀伤能力最强,均显著高于T细胞组(P<0.01);CARⅣ与CAR V结构IFN-γ和TNF-α... |
| 关 键 词： | CD19 CD79b 双靶点嵌合抗原受体 淋巴瘤 |