| piggyBac转座子调节pPiggyBac-Rb质粒的构建 |
| |
| 引用本文： | 潘雪珂,陈朝,田思佳,余克明,庄菁.piggyBac转座子调节pPiggyBac-Rb质粒的构建[J].中国组织工程研究与临床康复,2012,16(20):3755-3758. |
| |
| 作者姓名： | 潘雪珂 陈朝 田思佳 余克明 庄菁 |
| |
| 作者单位： | 1. 中山大学中山眼科中心,广东省广州市,510060
2. Manoa Biosciences, Inc. Honolulu, Hawaii, 96822, USA |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目(30970923)~~ |
| |
| 摘 要： | 背景:外源性Rb基因的导入是抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖的有效途径,piggyBac转座子介导的外源基因表达载体高效安全,在基因治疗方面具有广阔的应用前景。目的:探讨piggyBac转座子介导的外源性Rb基因的转染效率及其对视网膜母细胞瘤细胞的抑制作用。方法:采用RT-PCR技术扩增Rb基因编码区Rb cDNA,定向插入到载体pPiggyBac,获得PiggyBac调节的Rb表达质粒pPiggyBac-Rb;通过单独转染或合并pPiggyBac-helper转染人视网膜母细胞瘤细胞SO-RB50。结果与结论:考马斯亮蓝染色证明piggyBac转座子系统的转染效率最高,荧光定量PCR以及免疫荧光实验证明其介导的目的基因Rb与宿主SO-RB50细胞基因组整合效率最高且可在细胞中长期稳定表达,MTT实验证明经其所介导的外源性Rb基因表达对细胞活性影响最为显著。结果提示piggyBac转座子有可能成为视网膜母细胞瘤基因治疗的安全有效载体。
|
| 关 键 词： | piggyBac转座子 SO-RB50细胞 转染 Rb基因 基因治疗 |
Expression of exogenous Rb gene mediated by piggyBac transposon in retinoblastoma cells |
| |
| Pan Xue-ke
,
Chen Zhao
,
Tian Si-jia
,
Joseph M. Kaminski
,
Yu Ke-ming
,
Zhuang Jing.Expression of exogenous Rb gene mediated by piggyBac transposon in retinoblastoma cells[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2012,16(20):3755-3758. |
| |
| Authors: | Pan Xue-ke Chen Zhao Tian Si-jia Joseph M Kaminski Yu Ke-ming Zhuang Jing |
| |
| Institution: | 1State Key Laboratory of Ophthalmology,Zhongshan Ophthalmic Center,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510060,Guangdong Province,China;2Manoa Biosciences,Inc.Honolulu,Hawaii,96822,USA |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
