| 脂肪分化相关蛋白通过抑制中性胆固醇酯水解酶表达促进RAW264.7细胞内脂质积蓄 |
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| 引用本文： | 袁旭,孟磊,陈雁斌,张瑞,袁中华.脂肪分化相关蛋白通过抑制中性胆固醇酯水解酶表达促进RAW264.7细胞内脂质积蓄[J].中国动脉硬化杂志,2018,26(2):115-121. |
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| 作者姓名： | 袁旭 孟磊 陈雁斌 张瑞 袁中华 |
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| 作者单位： | 南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室;湘南学院附属医院; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30971268) |
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| 摘 要： | 目的探讨RAW264.7巨噬细胞中脂肪分化相关蛋白(adipophilin)调控中性胆固醇酯水解酶(nCEH)表达进而介导脂质积蓄的作用机制。方法用已成功构建的沉默与高表达Adipophilin的逆转录病毒质粒载体转染包装细胞PA317,继而收集病毒液感染RAW264.7巨噬细胞,筛选出Adipophilin沉默细胞株和高表达细胞株。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹分析技术(Western blot)分别检测nCEH的mRNA和蛋白表达水平,液体闪烁计数仪、高效液相色谱法检测细胞内胆固醇流出及胆固醇酯含量。结果 (1)高表达Adipophilin的细胞组胆固醇、胆固醇酯含量明显高于空白对照组(P0.01),而沉默Adipophilin表达的细胞组则显著低于空白对照组(P0.01),Adipophilin可抑制nCEH mRNA和蛋白的表达。(2)用100 nmol/L蛋白激酶Cδ(PKCδ)激动剂佛波酯(PMA)孵育高表达Adipophilin的RAW264.7细胞30 min后,nCEH的mRNA与蛋白表达水平明显降低(P0.05),而用100 nmol/L PKCδ抑制剂卡马拉素(Rottlerin)同样孵育30 min后,nCEH的表达水平较对照组增高(P0.05)。结论 Adipophilin促进巨噬细胞内脂质积蓄可能通过抑制nCEH表达来实现,在这一调控机制中PKCδ发挥了重要作用。
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| 关 键 词： | 脂肪分化相关蛋白 中性胆固醇酯水解酶 蛋白激酶Cδ 动脉粥样硬化 |
| 收稿时间： | 2017/9/1 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2017/11/18 0:00:00 |
Adipophilin enhances intracellular lipid accumulation by inhibiting neutral cholesterol ester hydrolase in RAW264.7 macrophages |
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| YUAN Xu,MENG Lei,CHEN Yan-Bin,ZHANG Rui and YUAN Zhong-Hua.Adipophilin enhances intracellular lipid accumulation by inhibiting neutral cholesterol ester hydrolase in RAW264.7 macrophages[J].Chinese Journal of Arteriosclerosis,2018,26(2):115-121. |
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| Authors: | YUAN Xu MENG Lei CHEN Yan-Bin ZHANG Rui and YUAN Zhong-Hua |
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| Institution: | Institute of Cardiovascular Disease, University of South China, Hengyang 421001, Hunan, China,Institute of Cardiovascular Disease, University of South China, Hengyang 421001, Hunan, China,Affiliated Hospital of Xiangnan University, Chenzhou 423000, Hunan, China,Institute of Cardiovascular Disease, University of South China, Hengyang 421001, Hunan, China and Institute of Cardiovascular Disease, University of South China, Hengyang 421001, Hunan, China |
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