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| 真核表达人呼吸道合胞病毒F蛋白的纯化方法 | |
| 引用本文： | 陆燕燕,何金生,张梅,虞结梅,谢灿,袁媛,薛绍礼,宋蔚,郑娴娴.真核表达人呼吸道合胞病毒F蛋白的纯化方法[J].免疫学杂志,2008,24(2):188-191. |
| 作者姓名： | 陆燕燕 何金生 张梅 虞结梅 谢灿 袁媛 薛绍礼 宋蔚 郑娴娴 |
| 作者单位： | 1. 安徽医科大学免疫学教研室,合肥,230032 2. 安徽医科大学免疫学教研室,合肥,230032;北京交通大学理学院生物科学与技术研究所,北京,100044 3. 安徽医科大学生物技术教研室,合肥,230032 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金 , 北京交通大学校科研和教改项目 |
| 摘 要： | 目的 真核表达人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,SV)融合蛋白(fusion protein,),并完成蛋白纯化及纯度测定.方法 根据编码F蛋白的基因序列设计引物,CR方法扩增出3'端带His标签的F基因序列,克隆入pGEM-T-easy载体,经核酸序列分析后,进一步克隆到pcDNA3.1( )真核表达载体,限制性内切酶鉴定,用脂质体Lipofectamine2000转染COS-7细胞,2 h后再用Westem blot检测目的蛋白的表达.Ni柱亲和层析纯化COS-7细胞表达的F蛋白,高效毛细管电泳分析纯化后蛋白纯度.结果 核酸序列分析证实获得带His标签的RSV F基因序列,没有发生无义突变.转染COS-7细胞后,利用Western blot方法检测到F蛋白的特异性条带,纯度达99%以上.结论 初步建立了真核表达RSV F蛋白的纯化方法,为进一步优化RSV F蛋白制备条件及单克隆抗体及诊断试剂等研究奠定了基础. |
| 关 键 词： | 人呼吸道合胞病毒 F基因 真核表达 纯化 |
| 文章编号： | 1000-8861（2008）02-0188-04 |
| 收稿时间： | 2007-09-07 |
| 修稿时间： | 2007-12-11 |
Purification of the fusion protein of human respiratory syncytial virus expressed in eukaryotic expression vector |
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| LU Yan-yan,HE Jin-sheng,HANG Mei,U Jie-mei,IE Can,UAN Yuan,UE Shao-li,ONG Wei,HENG Xian-xian.Purification of the fusion protein of human respiratory syncytial virus expressed in eukaryotic expression vector[J].Immunological Journal,2008,24(2):188-191. | |
| Authors: | LU Yan-yan HE Jin-sheng HANG Mei U Jie-mei IE Can UAN Yuan UE Shao-li ONG Wei HENG Xian-xian |
| Abstract: | |
| Keywords: | Human respiratory syncyfial virus F gene Eukaryotic expression Purification |
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