| 鼠抗人4-1BB单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定 |
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| 引用本文： | 周桓,张光波,董秋明,於葛华,徐颖,张学光.鼠抗人4-1BB单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定[J].细胞与分子免疫学杂志,2011,27(9):993-996. |
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| 作者姓名： | 周桓 张光波 董秋明 於葛华 徐颖 张学光 |
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| 作者单位： | 1. 苏州大学,附属第四医院检验科,江苏无锡214062;医学生物技术研究所,江苏苏州215003
2. 苏州大学,医学生物技术研究所,江苏苏州215003 |
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| 基金项目： | 江苏省卫生厅重点实验室项目(K0622); 国家自然科学基金资助项目(30330540) |
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| 摘 要： | 目的:鼠抗人4-1 BB分子功能性单克隆抗体(mAb)的研制及其生物学特性的鉴定.方法:以高表达人4-1 BB分子的转基因细胞293T/4-1 BB为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,并以293T/4-1BB为阳性抗体筛选细胞,293T/mock为阴性抗体筛选细胞,经免疫荧光标记和流式细胞术(FCM)分析、反复筛选和多次克隆化培养,筛选出特异分泌鼠抗人4-1BB分子mAb的杂交瘤细胞株；采用Western blot、间接免疫荧光法、竞争结合抑制试验、3H掺入和细胞凋亡分析等方法对mAb进行生物学特性的鉴定.结果:成功获得3株持续、稳定分泌鼠抗人4-1BB mAb的杂交瘤细胞株,命名为1G5、4B11和9F11.对mAb的生物学功能的研究结果表明,3株mAb均能识别活化T细胞和单核细胞来源的树突状细胞(Mo-DC)表达的4-1BB分子.mAb 4B11能有效地激发T细胞体外增殖、抑制其凋亡,并能促进Mo-DC体外扩增,上调CD80、CD83、CD86和CD1α的表达.结论:获得的3株分泌鼠抗人4-1BB mAb的杂交瘤,所分泌的抗体具有特异性地识别人4-1BB分子；其中4B1 1 mAb具有激发T细胞增殖及促进Mo-DC体外扩增与成熟的作用,为激发型4-1BB mAb.
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| 关 键 词： | 4-1BB 杂交瘤 共刺激信号 单克隆抗体 |
Preparation of anti-human 4-1BB monoclonal antibody and characterization of its biological activities |
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| ZHOU Huan,ZHANG Guang-bo,DONG Qiu-ming,YU Ge-hua,XU Ying,ZHANG Xue-guang.Preparation of anti-human 4-1BB monoclonal antibody and characterization of its biological activities[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2011,27(9):993-996. |
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| Authors: | ZHOU Huan ZHANG Guang-bo DONG Qiu-ming YU Ge-hua XU Ying ZHANG Xue-guang |
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| Institution: | ZHOU Huan1,2,ZHANG Guang-bo2,DONG Qiu-ming2,YU Ge-hua2,XU Ying2,ZHANG Xue-guang21Department of Clinical Laboratory,No.4 Affiliated Hospital of Suzhou University,Wuxi 214062,2Biotechnology Institute of Soochow University,Suzhou 215007,China |
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| Abstract: | AIM: To prepare an anti-human 4-1BB functional monoclonal antibody and to characterize its biological activities.METHODS: A stable human 4-1BB molecule transfected cell line 293T/4-1BB was used as an antigen to immunize BALB/c mice.By means of the cell fusion by hybridoma technique and multiple cell subcloning and repeated screening with 293T/4-1BB as the antibody screening positive cell while 293T/mock as the negative cell.The hybridoma cell lines specifically secreting anti-4-1BB monoclonal antibodies wer... |
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| Keywords: | 4-1BB hybridoma costimulatory signals monoclonal antibody |
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