| 铜绿假单胞菌mexA基因原核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 程小平,沈定霞,罗燕萍,周光,陈荣,权秋宁.铜绿假单胞菌mexA基因原核表达载体的构建[J].南昌大学学报(医学版),2010,50(6). |
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| 作者姓名： | 程小平 沈定霞 罗燕萍 周光 陈荣 权秋宁 |
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| 作者单位： | 程小平(南昌大学第一附属医院检验科,南昌,330006);沈定霞,罗燕萍,周光,陈荣(中国人民解放军总医院微生物科,北京,100853);权秋宁(南昌大学医学院检验系2006级,南昌,330006) |
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| 基金项目： | 军队"十一·五"基金资助课题 |
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| 摘 要： | 目的 构建mexA基因的原核载体,为进一步表达MexA蛋白奠定基础.方法 从临床分离多重耐药的铜绿假单胞菌抽提DNA,经PCR扩增出mexAl基因与PUC18克隆载体连接,PCR、酶切及测序鉴定,再以PUC/mexA1质粒为模板PCR扩增mexA目的 基因,克隆至质粒pQE30中,构建表达质粒pQE30/mexA,构建的表达质粒pQE30/mexA转化大肠杆菌M15,培养后提取纯化重组质粒pQE30/mexA酶切鉴定.结果 获得长约1.5 kbPCR mexA1产物,酶切结果显示所构建的重组质粒PUC/mexA1已成功地克隆了mexA1(1.5 kb)基因,序列分析结果与PA01/mexA1序列相同,构建的表达质粒pQE30/mexA酶切鉴定,与插入pQE30的目的基因mexA(1.2 kb)片段相符.结论 含mexA(1.2 kb)基因的原核表达载体构建成功,为进一步表达MexA蛋白奠定了基础.
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| 关 键 词： | 铜绿假单胞菌 mexA基因 载体 |
Construction of mexA Gene Prokaryotic Expression Vectors to Pseudomonas Aeruginosa |
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