高效液相色谱——蒸发光散射检测法测定人肠黏膜通透性的方法学研究

目的 建立采用高效液相色谱蒸发光散射检测分析法(HPLC-ELSD)测定尿液中的乳果糖和甘露醇的排泄率,进而间接反映人肠黏膜通透性变化的方法.方法 采用高效液相色谱蒸发光散射器分别检测30例正常人和30例慢性乙型肝炎(重度)患者口服乳果糖和甘露醇混合液后6 h内尿中乳果糖和甘露醇排泄率的变化,以尿乳果糖、甘露醇排泄率的比值(L/M)反映上述2组人群肠黏膜通透性的变化,并加以比较.结果 采用该方法甘露醇和乳果糖能得到很好的分离,乳果糖的线性范围为0.65～13.0 μg/L(相关系数r=0.9980),甘露醇的线性范围为0.74～14.7 μg/L(相关系数r=0.9980).乳果糖和甘露醇日内精密度(RSD)分别为1.56%、0.65%(n=6),日间精密度(BSD)分别为1.77%、0.99%(n=6).乳果糖的加样回收率为98.68%～100.4%,平均值为99.51%;甘露醇的加样回心率为99.52%～100.5%,平均值为99.94%.乳果糖在尿中的最低检测浓度为94.2 μg/L,甘露醇在尿中的最低检测浓度为29.9 μg/L.正常人的L/M比值为0.0315±0.0134,慢性乙型肝炎(重度)患者的L/M比值为0.0430±0.0198.两者相比有显著性差异(P=0.011).结论 高效液相色谱蒸发光散射法检测肠道通透性的准确度高,重复性好,方法简便,是目前临床评价肠黏膜通透性变化的实用方法.与正常人相比,慢性乙型肝炎(重度)患者肠黏膜通透性明显增高.

Effect of High Performance Liquid Chromatography-Evaporative Light Scattering Detector on Measuring the Intestinal Permeability in Human

Objective To establish a new method that can detect the lactulose(L)and mannitol(M)in urine by high performance liquid chromatography with evaporative light scattering detector(HPLC-ELSD).Methods30 cases helthy human and 30 cases with chronic hepatitis B(severe degree)were measure the change of intestinal permeability by lactulos/mannitol ratio(L/M)respectively.The level of lactulose and mannitol in the urine were detect by high performance liquid chromatography with evaporative light scattering detector.Re...