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| 复制子荧光素酶表达质粒pSVK-luc的构建与应用 | |
| 引用本文： | 李盼,张亮,王宇,朱晓明,张巍,徐元基,于继云,阎瑾琦. 复制子荧光素酶表达质粒pSVK-luc的构建与应用[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2013, 29(7): 765-768 |
| 作者姓名： | 李盼 张亮 王宇 朱晓明 张巍 徐元基 于继云 阎瑾琦 |
| 作者单位： | 1. 新疆大学生命科学与技术学院,新疆乌鲁木齐,830046 2. 军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850 |
| 摘 要： | 目的 为研究复制子DNA疫苗在生物活体内的表达情况,构建含有荧光素酶报告基因的复制子表达质粒pSVK-luc.方法 PCR扩增荧光素酶报告基因,克隆入DNA复制子载体pSVK,酶切鉴定和测序分析筛选阳性重组质粒pSVK-luc；化学法转染人胚肾293T细胞,流式细胞术和免疫荧光法检测荧光素酶基因在293T细胞中的表达；利用基因电穿孔导入仪递送重组质粒至BALB/c小鼠股四头肌,活体成像仪动态观测荧光素酶基因在小鼠体内的表达.结果 pSVK-luc经相应酶切和测序鉴定,与预期设计完全一致.流式细胞术和免疫荧光检测均可见荧光素酶基因表达；同时活体成像仪也能检测到该基因在小鼠体内的表达.结论 pSVK-luc表达质粒的构建成功将为复制子DNA疫苗体内作用机制研究和体内电穿孔递送条件的优化奠定实验基础. |
| 关 键 词： | 荧光素酶基因 复制子载体 体内外表达 活体成像 |
Construction and application of the replicon DNA recombinant plasmid pSVK-luc |
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| Abstract: | |
| Keywords: | |
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