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巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)融合EGFP真核表达载体的构建及表达
引用本文:张晓红,唐圣松,李剑敏,龙治锋. 巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)融合EGFP真核表达载体的构建及表达[J]. 实用预防医学, 2005, 12(6): 1257-1260
作者姓名:张晓红  唐圣松  李剑敏  龙治锋
作者单位:1. 南华大学医学院组织学与胚胎学教研室,湖南,衡阳,421001
2. 南华大学药理教研室
基金项目:国家自然科学基金(30270684)、湖南省杰出中青年专家专项基金(02JJYB3004)
摘    要:目的 构建真核表达重组体pEGFP-M-CSF,并鉴定其在小鼠成纤维细胞NIH3T3细胞能否正确表达。方法 PCR扩增M-CSF基因,定向克隆入带有EGFP报告基因的真核表达载体,构建真核表达重组体pEGFP-M-CSF,脂质体介导将pEGFP-CSF转染人NH3T3细胞,以一步法RT-PCR检测其在NIH3T3细胞中的表达情况。结果 双酶切及测序鉴定证明成功构建真核表达重组体pEGFP-M-CSF,并在NIH3T3细胞中成功地表达了融合荧光蛋白,RT-PCR检测结果显示RT~PCR扩增产物与M~CSF目的基因片段大小相符,确实源于重组质粒转录后的。nRNA。结论 真核表达重组体pEGFP-M-CSF的成功构建及在体外真核细胞中有效表达,为进一步研究M-CSF在真核细胞中的信号调控奠定了一定的实验基础。

关 键 词:巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF) 增强型绿色荧光蛋白(EGFP) 基因表达
文章编号:1006-3110(2005)06-1257-04
收稿时间:2005-08-22
修稿时间:2005-08-22

Construction and Expression of Eukaryotic Expression Vector for M-CSF and EGFP Fusion Proteins
ZHANG Xiao- hong,TANG Sheng - song, LI Jian - min ,et al.. Construction and Expression of Eukaryotic Expression Vector for M-CSF and EGFP Fusion Proteins[J]. Practical Preventive Medicine, 2005, 12(6): 1257-1260
Authors:ZHANG Xiao- hong  TANG Sheng - song   LI Jian - min   et al.
Affiliation:ZHANG Xiao- hong,TANG Sheng - song, LI Jian - min , et al.
Abstract:
Keywords:M-CSF gene   Green fluorescent protein   Gene expression
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