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| rhG—CSF cDNA表达质粒的构建及其在COS7细胞中的表达 | |
| 引用本文： | 陈坚,曹韫旭.rhG—CSF cDNA表达质粒的构建及其在COS7细胞中的表达[J].第二军医大学学报,1997,18(4):313-315. |
| 作者姓名： | 陈坚 曹韫旭 |
| 摘 要： | 目的：构建一个能在哺乳动物细胞中高表达人粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）ｃＤＮＡ的重组质粒。方法：利用化学合成引物，进行ＰＣＲ，对人Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ５ＡＵＧ侧翼序列进行翻译优化突变。测序确证后，重组人表达载体ｐＥＤ，构建成质粒ＰＥＤ－ＧＣＳＦ，用ＤＥＡＥ－Ｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ７细胞，ＥＬＩＳＡ法定量测定ｒｈＧ－ＣＳＦ表达水平。结果：转染ＣＯＳ７细胞后４８ｈ收集的上清ｒｈＧ－ＣＳＦ表达量为５ |
| 关 键 词： | 基因重组 G－CSF 多肽生长因子 |
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