EGF通过PI3K/AKT通路诱导人晶状体上皮细胞移行

目的研究表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF）诱导人晶状体上皮细胞移行及其信号通路机制。方法培养人晶状体上皮细胞,用不同浓度EGF处理24h后,Phagokinetic Track Motility分析细胞的移动性;EGF（100μg·L^-1）孵育细胞不同时间后,Westernblot法检测磷酸化EGFR和AKT,并分别用PD153035（EGFR激酶抑制剂）和LY294002（PI3K/AKT抑制剂）预孵育细胞,观察上述指标;EGF（100μg·L-1）孵育细胞不同时间（12h、24h、48h）后,用酶谱法分析基质金属蛋白酶-2（matrix metallopreteinase-2,MMP-2）,并用PD153035、LY294002预孵育细胞,检测MMP-2活性及细胞的移行。设立对照组,结果进行单因素方差分析,P〈0.05表明差异有统计学意义。结果EGF可诱导培养人晶状体上皮细胞移行,并随浓度增加细胞的移动性有显著性提高;EGF可诱导EG-FR和AKT磷酸化,EGF处理后5min,EGFR和AKT的磷酸化达到峰值,作用可持续1h,EGFR抑制剂可阻断EGF诱导的AKT磷酸化;EGF可显著提高细胞中MMP-2的活性,并随时间延长活性增强,24～48h达到较高水平（1.4倍）,PD153035、LY294002可抑制MMP-2的活性以及细胞的移行。结论在人工培养的人晶状体上皮细胞中,EGFR/PI3K/AKT通路介导了EGF刺激MMP-2的激活和体外培养人晶状体上皮细胞的移行,这一通路可被EGFR激酶抑制剂、PI3K/AKT抑制剂阻断,这些涉及的信号通路可能形成潜在的治疗后囊膜混浊的靶点。

Human lens epithelial cells migration induced by epidermal growth factor through PI3K/AKT pathways