| 马蓝色氨酸合成酶基因的克隆及表达分析 |
| |
| 引用本文： | 马小毛,宁书菊,叶齐,胡永乐,蔡国倩,魏道智.马蓝色氨酸合成酶基因的克隆及表达分析[J].中草药,2020,51(24):6328-6336. |
| |
| 作者姓名： | 马小毛 宁书菊 叶齐 胡永乐 蔡国倩 魏道智 |
| |
| 作者单位： | 福建农林大学生命科学学院, 福建 福州 350002;福建农林大学作物科学学院, 福建 福州 350002 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目（81573517）；福建省自然科学基金面上资助项目（2019J01827） |
| |
| 摘 要： | 目的 克隆马蓝Baphicacanthus cusia吲哚类生物碱合成途径的色氨酸合成酶（tryptophan synthase，TSB）基因，命名为BcTSB（GenBank登录号AYM45644.1），对其生物信息学和表达进行分析。方法 基于前期马蓝转录组数据库，获得BcTSB基因开放阅读框（ORF），运用生物信息学手段对基因功能做出初步预测，构建pET32a-BcTSB原核表达载体，并转化大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测。通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测马蓝不同组织（根、茎、叶）中TSB表达水平。结果 克隆的BcTSB基因ORF长度为1 452 bp，编码483个氨基酸，生物信息学预测为亲水性蛋白，定位于叶绿体，该蛋白相对分子质量为51 665.89，pET-32a载体包含18 000的标签。SDS-PAGE分析在70 000处出现目的蛋白条带，与理论预期值大小一致。qRT-PCR分析显示BcTSB基因在马蓝不同组织中均有表达，且在茎中的表达量最高。结论 通过对BcTSB基因的克隆及表达分析，为进一步研究该基因功能及调控奠定了实验基础。
|
| 关 键 词： | 马蓝 BcTSB基因 克隆 生物信息学分析 原核表达 qRT-PCR |
| 收稿时间： | 2020/6/9 0:00:00 |
Cloning and expression analysis of tryptophan synthase gene BcTSB in Baphicacanthus cusia |
| |
| MA Xiao-mao,NING Shu-ju,YE Qi,HU Yong-le,CAI Guo-qian,WEI Dao-zhi.Cloning and expression analysis of tryptophan synthase gene BcTSB in Baphicacanthus cusia[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2020,51(24):6328-6336. |
| |
| Authors: | MA Xiao-mao NING Shu-ju YE Qi HU Yong-le CAI Guo-qian WEI Dao-zhi |
| |
| Institution: | College of Life Science, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China;College of Crop Science, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Baphicacanthus cusia (Nees) Bremek BcTSB gene clone bioinformatics analysis prokaryotic expression qRT-PCR |
|
| 点击此处可从《中草药》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《中草药》下载免费的PDF全文 |
|
