小鼠干扰素调节因子3启动子质粒的构建及其启动子活性分析 |
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引用本文: | 刘立飞,杨婷婷,徐华国,周国平.小鼠干扰素调节因子3启动子质粒的构建及其启动子活性分析[J].江苏医药,2012,38(2):134-136. |
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作者姓名: | 刘立飞 杨婷婷 徐华国 周国平 |
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作者单位: | 刘立飞 (南京医科大学第一附属医院儿利, 江苏省,210029) ; 杨婷婷 (南京医科大学第一附属医院儿利, 江苏省,210029) ; 徐华国 (南京医科大学第一附属医院儿利, 江苏省,210029) ; 周国平 (南京医科大学第一附属医院儿利, 江苏省,210029) ; |
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基金项目: | 国家自然科学基金,江苏省医学重点人才项目资助 |
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摘 要: | 目的构建包含小鼠干扰素调节因子3(mIRF-3)基因启动子的质粒,并评价其启动子活性。方法以小鼠全血细胞总DNA为模板,PCR扩增mIRF-3目的片段,亚克隆此片段至pGL3-basic荧光素酶报告基因的多克隆位点,构建含mIRF-3启动子的重组报告质粒pmIRF-3。将pmIRF-3、pGL3-basic和pGL3-control质粒分别转染小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3后,行荧光素酶活性检测,计算相对活性单位(RLU)。生物信息学分析转录因子结合位点。结果成功构建了重组报告质粒pmIRF-3。与pGL3-basic组相比,pmIRF-3、pGL3-control组RLU明显增加(0.443±0.113vs.18.907±3.335、25.704±5.850)(P<0.01)。mIRF-3启动子区域内存在AML-1a、E2F、MZF1、CdxA、OCT-x等多个转录因子结合位点。结论 mIRF-3转录起始位点附近1479bp序列在NIH3T3细胞中具有较强的启动子活性。
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关 键 词: | 干扰素调节因子3 启动子活性 |
Construction of plasmid containing promoter of mouse interferon regulatory factor 3 and analysis of its promoter activity |
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Institution: | LIU Lifei,YANG Tingting,XU Huaguo,et al.Department of Pediatrics,First Affiliated Hospital,Nanjing Medical University,Nanjing 210029,CHINA |
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Abstract: | |
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Keywords: | Interferon regulatory factor 3 Promoter activity |
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