miR-1187靶向调控Arhgef9在七氟醚致海马神经元凋亡中的作用

目的探讨miR-1187靶向调控Rho鸟苷交换因子-9（Arhgef9）在七氟醚致小鼠海马神经元凋亡中的调控作用。方法通过基因芯片技术测定小鼠海马miRNA。利用miRWalk数据库对差异miRNA的靶基因进行预测。为验证预测结果与实际情况是否相符，同步进行mRNA水平的表达谱芯片实验，筛选出与差异miRNA确有互作关系的mRNA。为说明miRNA与mRNA的互作关系，进一步利用David数据库对靶基因进行注释，最终形成miRNA与mRNA共表达网络。采用RT-PCR法检测海马神经元miR-1187mRNA相对表达量，细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测miR-1187转染后海马神经元存活率，荧光素酶实验检测Arhgef9是否为miR-1187的靶基因。结果海马神经元凋亡主要与9个miRNA相关，即miR-101b-3p、miR-1187、miR-188-5p、miR-219a-5p、miR-338-3p、miR-425-5p、miR-467a-3p、miR-705、miR-92a-3p。miR-1187在七氟醚诱导海马神经元损伤模型中的相对表达量明显降低（P＜0.05），miR-1187高表达质粒（miR-1187mimics）转染后，海马神经元存活率明显升高（P＜0.05）。miR-1187与Arhgef9存在靶向关系，miR-1187通过与Arhgef9基因mRNA的3忆非翻译区互补配对来发挥作用。结论miR-1187是海马神经元抗细胞凋亡的抑制因子；高表达miR-1187通过靶向调节Arhgef9mRNA表达来抑制海马神经元凋亡的发生。