下调细胞因子信号转导抑制因子3表达对2型糖尿病大鼠糖代谢影响的研究 |
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引用本文: | 张旭,章爱莲,陈俊国,陆燕.下调细胞因子信号转导抑制因子3表达对2型糖尿病大鼠糖代谢影响的研究[J].浙江医学,2018,40(17):1926-1929. |
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作者姓名: | 张旭 章爱莲 陈俊国 陆燕 |
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作者单位: | 嘉兴市第二医院儿科/嘉兴市儿童医学中心 |
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基金项目: | 浙江省公益性技术应用研究计划项目(2013C37028) |
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摘 要: | 目的探讨RNA干扰(RNAi)技术下调肝脏和骨骼肌细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)表达对2型糖尿病(T2DM)大鼠糖代谢的影响。方法构建并筛选SOCS3短发夹状RNA(shRNA)表达质粒,与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒。制备T2DM大鼠模型,采用随机数字表法分为对照组和干扰组各15只,于实验第1天和第15天对照组尾静脉注射非干扰序列慢病毒1.5ml/次,干扰组尾静脉注射SOCS3RNAi慢病毒1.5ml/次。4周后检测大鼠空腹胰岛素(FINS)和空腹血糖(FPG)水平,计算胰岛素抵抗指数(IRI)和胰岛素敏感指数(ISI);实时荧光定量PCR法和Westernblot法检测大鼠肝脏和骨骼肌组织中SOCS3mRNA和蛋白表达水平。结果成功构建了SOCS3shRNA慢病毒表达质粒,其在C6大鼠神经胶质瘤细胞中可抑制SOCS3表达,其抑制率为70%,获得的慢病毒滴度为1.0×109TU/ml。干扰组肝脏和骨骼肌组织中SOCS3mRNA和蛋白表达水平较对照组均明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.01)。干扰组FINS、FPG和IRI较对照组均明显下降,而ISI较对照组明显上升,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论利用RNAi技术下调T2DM大鼠SOCS3基因可提高T2DM大鼠胰岛素敏感性,缓解胰岛素抵抗程度。
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