PTEN-Long对肝癌细胞的抑制作用研究

目的探讨第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白（PTEN）基因编码PTEN的一种变形体PTEN-Long对肝癌细胞的抑制作用。方法细胞质粒转染法转染PTEN-Long于人肾上皮293T细胞，其溶解产物通过疏水作用和离子交换作用分离纯化PTEN-Long蛋白；采用Westernblot法检测分离纯化的PTEN-Long蛋白；以不同浓度PTEN-Long蛋白干预肝癌HepG2、HUH6、FOCUS细胞，并采用MTS法检测细胞存活情况。将40只129S1/SvImJ小鼠按随机数字表法分为PTEN-Long组（腹腔注射0.2mlPTEN-Long，剂量4mg/kg体重，1次/d）和对照组（腹腔注射0.2ml0.9%氯化钠注射液，1次/d），每组20只。小鼠大腿根部接种肝癌HepG2（两组分别各10只）或HUH6（两组分别各10只）细胞混合液，游标卡尺测量计算肿瘤体积。结果分离纯化后PTEN-Long蛋白纯度较高，约80%。与空白对照组比较，5nmol/L浓度以上的PTEN-Long对肝癌HepG2、HUH6细胞有明显的抑制作用，差异均有统计学意义（均P＜0.05），而PTEN-Long对肝癌FOCUS细胞无明显抑制作用，差异均无统计学意义（均P＞0.05）。异种移植试验显示，与对照组相比，PTEN-Long组小鼠肿瘤体积明显较小（P＜0.05）。结论分离纯化提取的PTEN-Long对肝癌细胞起抑制作用，这或为肝癌分子靶向治疗提供新思路。