| hVEGFA基因重组腺病毒载体的构建及其转染效率的研究 |
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| 引用本文： | 李慧勇,袁志诚,陈波,陆培松,李巧玉,曹侃. hVEGFA基因重组腺病毒载体的构建及其转染效率的研究[J]. 江苏大学学报(医学版), 2010, 20(5) |
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| 作者姓名： | 李慧勇 袁志诚 陈波 陆培松 李巧玉 曹侃 |
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| 作者单位： | 江苏大学附属人民医院神经外科,江苏,镇江,212002 |
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| 基金项目： | 镇江市科技基金资助项目 |
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| 摘 要： | ![]()
目的:应用AdEasy复制缺陷型腺病毒载体系统构建携带hVEGFA基因的重组腺病毒载体.方法:采用分子克隆技术,从PCR2.1-hVEGFA质粒中克隆出hVEGFA基因的编码序列,酶切、连接后,插入腺病毒系统中的穿梭载体pAdTrack-CMV,获得重组质粒pAdTrack-CMV-hVEGFA,将其转化含有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠埃希菌BJ5183,进行同源重组,获得重组子pAdeasy-1-hVEGFA.鉴定后,将pAdeasy-1-hVEGFA转染人胚肾细胞(HEK293A细胞),获得含hVEGFA基因的重组腺病毒(rAd-hVEGFA).反复感染HEK293A细胞扩增腺病毒,50%组织培养感染量法(TCID50)检测病毒滴度,荧光显微镜观测绿色荧光蛋白(GFP)的表达.结果:成功构建出含有hVEGFA基因的腺病毒载体rAd-hVEGFA,转染HEK293A细胞后出现绿色荧光蛋白表达,证明腺病毒载体rAd-hVEGFA 转染成功,通过反复感染HEK293A细胞获得大量病毒.结论:成功构建含有hVEGFA基因的腺病毒载体rAd-hVEGFA,可为缺血性脑血管疾病的基因治疗提供基因载体.
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| 关 键 词： | hVEGFA基因 腺病毒载体 转染 缺血性脑血管疾病 |
Construction of hVEGFA gene recombinant adenovirus vector and its efficiency of transfection |
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| LI Hui-yong,YUAN Zhi-cheng,CHEN Bo,LU Pei-song,LI Qiao-yu,CAO Kan. Construction of hVEGFA gene recombinant adenovirus vector and its efficiency of transfection[J]. Journal of Jiangsu University Medicine Edition, 2010, 20(5) |
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| Authors: | LI Hui-yong YUAN Zhi-cheng CHEN Bo LU Pei-song LI Qiao-yu CAO Kan |
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| Abstract: | ![]()
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