选择性脊神经后根切断刺激对大鼠脊髓腰膨大以及脑干网状结构抑制区和易化区c-Fos表达的影响

目的：将选择性脊神经后根切断作为刺激源，观察刺激后不同时间点大鼠脊髓腰膨大以及脑干网状结构抑制区和易化区兴奋神经元细胞核中c—Fos蛋白表达的差异，探讨其对神经元活性和功能的影响。方法：实验于2004—02/06在郑州大学人体解剖学教研室完成。将成年Wistar大鼠64只随机分为脊神经后根切断组（n=24），假手术组（n=24）和正常对照组（n=16）。①模型制作：取背部正中切口，在&;#215;10手术显微镜下咬除腰1和腰2椎板，分离左侧腰3-6脊神经后根，并切断2mm。假手术组只暴露脊髓，不进行脊神经后根切断。②组织切片的制备：分别于术后1，2，6和12h相应的时间点，对各组动物进行心脏灌注后，取动物脊髓的腰膨大和脑干部，连续冠状切片，按Paxinos和Watson图谱进行组织核团定位。③免疫组织化学法染色后，在光镜下进行细胞计数和摄影。④细胞计数：光镜下对各切片的免疫阳性细胞进行计数,c-Fos蛋白阳性表达判定标准为细胞核染成深棕色，胞浆未染色，神经细胞无形态轮廓显示。每只大鼠观察腰膨大6张切片，分别计数左侧脊髓灰质板层Ⅰ～Ⅵ内c-Fos蛋白阳性表达细胞核的数量；观察网状结构抑制区和易化区切片6张，计数阳性标记细胞核数量。结果：脊神经后根切断组动物在手术后有2只死亡，随即进行了补充，纳入最后分析的动物为24只；假手术组动物24只，正常对照组动物16只，全部进入统计分析。①各组大鼠左侧腰髓3-6灰质板层Ⅰ～Ⅵ c—Fos的表达：脊神经后根切断组脊髓损伤后1，2，6，12h时间点均有明显表达，主要集中在Ⅰ～Ⅲ板层；假手术组在1，2，6h有少量表达；对照组在各个时间点基本无表达。脊神经后根切断组在各个时间点的表达均高于与假手术组和对照组，差异有显著性（P〈0．05）。②各组大鼠右侧脑干网状结构c—Fos的表达：在抑制区，各组各个时间点均无明显表达。在易化区，脊神经后根切断组可见大量c-Fos蛋白阳性细胞表达，假手术组有散在细胞表达，对照组基本无表达。脊神经后根切断组在各个时间点的表达均高于与假手术组和对照组，差异有显著性（P〈0．05）。结论：本实验观察到选择性脊神经后根切断可引起大鼠同侧腰髓灰质后角和对侧脑干网状结构易化区c—Fos的大量表达，说明脊神经后根切断和网状结构易化区神经元功能的改变存在着密切的联系。结合易化区的功能，推测脊神经后根的切断改变了网状结构抑制区和易化区神经元的活性状态，从而通过网状结构的传出纤维影响各个运动核团，降低了相应核团的兴奋性，从而缓解了痉挛的过程。

Effect of selective posterior rhizotomy on the c-Fos expression in the enlarged I~nbar spinal cord and the facilitation and inhibition sections in reticular formation of brain stem in rats