靶向人Ku70 mRNA反义核苷酸的优化设计与筛选 |
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引用本文: | 王雪峰,尹永杰,杨华,王占义,王飞,穆亚冰,翟仁义. 靶向人Ku70 mRNA反义核苷酸的优化设计与筛选[J]. 吉林大学学报(医学版), 2007, 33(6): 1091-1093. DOI: 长春市科技局资助课题(03-222561) |
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作者姓名: | 王雪峰 尹永杰 杨华 王占义 王飞 穆亚冰 翟仁义 |
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作者单位: | 1.吉林大学第二医院妇产科,吉林 长春 130041;2.军事医学科学院放射医学研究所,北京 100850;3.中国人民解放军总医院妇产科,北京 100853 |
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基金项目: | 吉林省长春市科技局科研项目 |
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摘 要: | 目的:联合应用RNAdraw和Sfold软件设计并筛选低毒且高效抑制Hela细胞Ku70 mRNA表达的反义寡核苷酸。方法:从GenBank获得人Ku70 mRNA全序列,联合应用RNAdraw与Sfold软件,根据最小自由能原理设计多条20 nt的反义寡核苷酸,脂质体转染后MTT法检测其非序列特异性细胞毒性,选择毒性最小者并转染Hela细胞,RT-PCR检测转染前后Ku70 mRNA的表达水平并进行比较。结果:靶向Ku70 mRNA设计6条20 nt的反义寡核苷酸,其中NO.1 序列非特异性毒性最低,对Hela细胞的生长抑制率(50、100和200 nmol•L-1浓度组分别为4.8%、9.5%和10.2%)与脂质体组比较差异无显著性(P>0.05),用毒性最低序列转染Hela细胞后使Ku70 mRNA表达水平显著降低(P<0.01),条带强度和面积与未转染组比较分别下降81.6%和77.6%。结论:联合应用计算机软件RNAdraw和Sfold对设计反义核酸有较大的指导意义,能实现较高的命中率,设计的反义寡核苷酸能有效抑制Hela 细胞Ku70mRNA的表达。
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关 键 词: | 寡核苷酸类 反义 Hela细胞 逆转录聚合酶链反应 |
文章编号: | 1671-587X(2007)06-1091-03 |
收稿时间: | 2007-03-26 |
修稿时间: | 2007-03-26 |
Application of oxygen concentration in expiratory gas and oxygen saturation of blood in oral and maxillofacial surgery |
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Abstract: |
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