高效液相色谱法测定叶酸片的含量与有关物质

目的建立测定叶酸片含量及有关物质的高效液相色谱（HPLC）法。方法采用 Hypersil C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，流动相磷酸盐缓冲液（磷酸二氢钾6.8 g与0.1 mol•L－1氢氧化钾溶液70 mL，加水稀释至800 mL，调节pH至6.3，加甲醇80 mL，用水稀释成1 000 mL为流动相），检测波长254 nm。结果叶酸在19.80～277.24 μg•mL－1浓度范围内，峰面积与浓度呈良好线性关系（r＝0.999 9，n＝7），平均回收率98.65%～98.95%，RSD＝0.20%～0.60% （n＝9）。叶酸及其有关物质得到基线分离，方法最低检测限0.6 ng，控制总杂质量不得超过2.0%。结论该方法测定叶酸片的含量及有关物质，方法简便、快速、结果准确，专属性好，适用于叶酸片及其制剂的质量控制。