| 人源性纤溶酶原Kringle 5基因杆状病毒表达载体构建及蛋白表达纯化 |
| |
| 引用本文： | 董丽,郭睿,李彪. 人源性纤溶酶原Kringle 5基因杆状病毒表达载体构建及蛋白表达纯化[J]. 上海交通大学学报(医学版), 2008, 28(9) |
| |
| 作者姓名： | 董丽 郭睿 李彪 |
| |
| 作者单位： | 上海交通大学,医学院瑞金医院核医学科,上海,200025;上海交通大学,医学院瑞金医院核医学科,上海,200025;上海交通大学,医学院瑞金医院核医学科,上海,200025 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，上海市科委资助项目 |
| |
| 摘 要： | ![]()
目的 构建重组人源性纤溶酶原Kringle 5(rhK5)杆状病毒表达载体并进行真核表达.方法 采用bac-to-bac杆状病毒表达系统制备杆状病毒Bacmid-rhK5,感染草地贪夜蛾卵巢细胞sf21昆虫细胞,经Western blot确定rhK5在sf21细胞中的表达方式和表达量.用血管内皮细胞抑制实验检测纯化蛋白活性.结果 杆状病毒表达载体pFastBac HTB-rhK5构建成功,Western blot检测发现,rhK5在sf21细胞中呈胞内表达,纯化后重组蛋白的产量约为90μg/L.血管内皮细胞抑制实验显示,半数有效剂量(ED50)为4μg/Ml.结论 rhK5杆状病毒表达载体于悬浮培养的sf21细胞中高效表达,为大量表达更接近天然的具有生物学活性的rhK5蛋白奠定了基础.
|
| 关 键 词： | 重组人源性纤溶酶原Kringle5 昆虫细胞 杆状病毒 蛋白表达 |
Construction and expression of eukaryotic expression vector for recombinant human plasminogen Kringle 5 gene |
| |
| DONG Li,GUO Rui,LI Biao. Construction and expression of eukaryotic expression vector for recombinant human plasminogen Kringle 5 gene[J]. Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science, 2008, 28(9) |
| |
| Authors: | DONG Li GUO Rui LI Biao |
| |
| Abstract: | ![]()
|
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
|
