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| 人卵泡抑素基因真核表达载体构建和体外表达 | |
| 引用本文： | 莫毅,梁方方,檀大羡,牛向丽,陈自洪,华荣,张海英,谢丹尼. 人卵泡抑素基因真核表达载体构建和体外表达[J]. 中国计划生育学杂志, 2011, 19(4): 210-212,220. DOI: 10.3969/j.issn.1004-8189.2011.4 |
| 作者姓名： | 莫毅 梁方方 檀大羡 牛向丽 陈自洪 华荣 张海英 谢丹尼 |
| 作者单位： | 1. 广西壮族自治区人口和计划生育研究中心,南宁,530021 2. 广西壮族自治区畜牧研究所 |
| 摘 要： | 目的:体外构建携带人卵泡抑素基因(FS)cDNA的真核表达载体,并观察其在幼年叙利亚地鼠肾细胞(BHK21)中的表达。方法:从新鲜人卵泡抽提液细胞中提取RNA,应用RT-PCR方法扩增人FScDNA序列,克隆到pMD-18T载体中,构成pMD-FS重组克隆质粒。经测序鉴定后,双酶切得到人FS基因cDNA序列,插入到真核表达载体pEGFP-N1中,构成pEGFP-FS重组表达质粒。pEGFP-FS重组表达质粒经酶切和PCR鉴定,通过脂质体2000介导瞬时转染BHK21细胞,并检测绿色荧光蛋白(GFP)的荧光表达。结果:成功构建pMD-FS重组克隆质粒,FScDNA序列测序结果与GenBank中公布的序列(Genbank NM_013409.1)同源性为100%;成功构建pEGFP-FS重组表达质粒,将其转染BHK21细胞后,观察到绿色荧光蛋白的表达。结论:本实验成功构建了人FS的pMD-FS重组克隆质粒和pEGFP-FS重组表达质粒,为进一步研究FS对哺乳动物卵泡发育的影响奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 卵泡抑素 真核表达载体 基因转染 绿色荧光蛋白 |
Construction and in vitro expression of eukaryotic expression plasmid with human FS gene |
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| Mo Yi,Liang Fangfang,Tan Daxian,Niu Xiangli,Chen Zihong,Hua Rong,Zhang Haiying,Xie Danni. Construction and in vitro expression of eukaryotic expression plasmid with human FS gene[J]. Chinese Journal of Family Planning, 2011, 19(4): 210-212,220. DOI: 10.3969/j.issn.1004-8189.2011.4 | |
| Authors: | Mo Yi Liang Fangfang Tan Daxian Niu Xiangli Chen Zihong Hua Rong Zhang Haiying Xie Danni |
| Affiliation: | Mo Yi1,Liang Fangfang2,Tan Daxian1,Niu Xiangli1,Chen Zihong1,Hua Rong1,Zhang Haiying1,Xie Danni11.Research center for population and family planning of Guangxi Zhuangzu Autonomous Region,Nanning 530021,2.Guangxi Institute of Animal Science |
| Abstract: | |
| Keywords: | Follistatin Eukaryotic expression plasmid Gene transfection Recombinant plasmid |
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