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pGL3-hTERT-tk/GCV对胃癌细胞的促凋亡作用
作者姓名:邓志华  杨长青  王桂琴  王晶晶
作者单位:1.山西医科大学 第二医院 消化科, 山西 太原 030001;1.山西医科大学 第二医院 消化科, 山西 太原 030001;2.山西医科大学基础医学院 微生物与免疫学教研室, 山西 太原 030001;2.山西医科大学基础医学院 微生物与免疫学教研室, 山西 太原 030001
基金项目:国家自然科学基金资助项目(No.30672405),山西省青年科技基金(No.20001028)
摘    要:目的:探讨重组质粒pGL3 hTERT tk/GCV对胃癌细胞的促调亡作用。方法:以基因工程方法构建重组质粒pGL3 hTERT tk和相应的荧光报告质粒pGL3 hTERT tk Luc+;脂质体LipofectamineTM2000瞬时转染胃癌细胞系SGC 7901并用GCV干预,荧光显微镜观察细胞形态变化和转染效率,TUNEL标记和流式细胞术观察转染后胃癌细胞的凋亡;以上实验均以正常肝细胞L 02为对照。结果:经鉴定,重组质粒pGL3 hTERT tk中tk片段的长度为1 100 bp。荧光素酶标记的阳性、阴性对照及治疗报告质粒pGL3 hTERT tk Luc+均能有效转染高表达端粒酶活性的胃癌细胞SGC 7901,转染效率为(8.2±114)%。重组质粒转染胃癌细胞后与GCV共育4 d,细胞的凋亡率为(60.0±1.56)%;被pGL3 hTERT tk转染的肿瘤细胞细胞周期发生了变化,处于细胞周期早期的细胞大量凋亡,早期凋亡率为(47.1±1.35)%。〖HT5W〗结论:〖HT5"SS〗pGL3 hTERT tk/GCV对胃癌细胞有强烈的杀伤作用,但不影响正常细胞的生长,有潜在临床应用前景。

关 键 词:胃癌  基因治疗  hTERT启动子  自杀基因  单纯疱疹病毒胸苷激酶
收稿时间:2008-02-21
修稿时间:2008-04-15
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