阿托品对人视网膜色素上皮细胞D407株 表达及分泌TGF β2的调控

目的：通过观察不同浓度阿托品联合10-5 mol/L卡巴胆碱干预下D407细胞表达及分泌TGF β2的变化，探讨阿托品对RPE细胞表达及分泌TGF β2的调控作用。方法：常规培养D407细胞，药物干预前换用无血清培养基培养, 分为4组。（1）实验组（A组）：A1~A5组依次加入10-4～10-8 mol/L阿托品，孵育30 min后每组加入10-5 mol/L卡巴胆碱；（2）阴性对照组（B组）：B1~B5组依次加入10-4～10-8 mol/L阿托品；（3）阳性对照组（C组）：加入10-5 mol/L卡巴胆碱；（4）空白对照组（D组）：不加药物。干预24 h后采用RT PCR,Western印迹及ELISA法检测细胞胞浆中TGF β2 mRNA及蛋白质的表达水平及上清液中TGF β2的含量。统计学方法采用单因素方差分析。结果：实验组D407细胞胞浆TGF β2 mRNA和蛋白质表达水平及上清中TGF β2蛋白质含量均较阳性对照组低，10-4 mol/L阿托品可完全阻断10-5 mol/L卡巴胆碱上调TGF β2表达及分泌的作用，其效应具有浓度依赖性（F=1 056.897, 1 320.170, 475.657;P＜0.001）。阴性对照组D407细胞胞浆TGF β2 mRNA和蛋白质表达水平及上清中TGF β2蛋白质含量与空白对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：阿托品可有效抑制卡巴胆碱促进人RPE细胞表达及分泌TGF β2的功能，提示M受体参与介导此过程。