| 人survivin的克隆、在大肠杆菌中的表达及活性鉴定 |
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| 引用本文： | 别俊 孙茂盛 孙强明 郑建平 孙雯佳. 人survivin的克隆、在大肠杆菌中的表达及活性鉴定[J]. 第一军医大学学报, 2004, 24(8): 913-916 |
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| 作者姓名： | 别俊 孙茂盛 孙强明 郑建平 孙雯佳 |
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| 作者单位： | [1]昆明医学院研究生部，云南昆明650031 [2]中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所分子生物室，云南昆明650118 [3]昆明市延安医院，云南昆明650023 |
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| 摘 要： | 目的在原核中高效表达及活性鉴定重组人survivin蛋白分子。方法应用RT-PCR的方法得到survivin的cDNA．并构建成pBV220-survivin原核表达质粒，将其导入Ecoli Bl21(Gold)中，诱导表达survivin蛋白。通过DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱和Sephacryl S-200分子筛二步柱纯化以获取目的蛋白。用Western blotting检测表达产物。结果PT-PCR产物经测序分析与预期结果完全一致，表达质粒在E-coli Bl21(Gold)中得到高效表达，表达的survivin蛋白占总蛋白含量的30％以上，表达产物以包涵体的形式存在。通过离子交换柱和分子筛二步柱纯化及复性后获得的目的蛋白，其纯度达到95％以上。Western blotting证明表达产物具有特异性。结论获得了较高纯度的survivin蛋白。为进一步深入研究该蛋白的细胞凋亡调控功能提供了工具。
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| 关 键 词： | surivivin 克隆 基因表达 纯化 |
Cloning, expression and identification of human survivin in E. coli] |
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| Jun Bie,Mao-sheng Sun,Qiang-ming Sun,Jian-ping Zheng,Wen-jia Sun. Cloning, expression and identification of human survivin in E. coli][J]. Journal of First Military Medical University, 2004, 24(8): 913-916 |
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| Authors: | Jun Bie Mao-sheng Sun Qiang-ming Sun Jian-ping Zheng Wen-jia Sun |
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| Affiliation: | Graduate School of Kunming Medical College, Kunming 650031, China. bj520307@sina.com |
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