| 丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式激活基因NS5ATP9的克隆化研究 |
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| 引用本文： | 李强,梁耀东,成军,王琳,程明亮. 丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式激活基因NS5ATP9的克隆化研究[J]. 胃肠病学和肝病学杂志, 2003, 12(3): 254-256 |
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| 作者姓名： | 李强 梁耀东 成军 王琳 程明亮 |
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| 作者单位： | 100039,北京,解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心 |
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| 摘 要： | ![]()
目的 筛选并克隆丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)反式激活新型靶基因，研究HCV NS5A反式激活作用的分子生物学机制。方法 应用抑制性消减杂交技术(SSH)及生物信息学技术，以HCV NS5A表达质粒pcDNA3．1(-)-NS5A转染HepG2细胞，以空载体pcDNA3．1(-)为平行对照，提取mRNA并进行抑制性消减杂交分析。对于所获基因片段序列分析表明，其中之一为新型基因片段，与GenBank中注册的已知功能基因序列没有同源性，利用表达序列标签(EST)序列数据库的搜索和比对，进行电子拼接，根据基因起始密码子的Kozak规则和终止密码子下游保守的多聚腺苷酸信号序列，确定新型基因序列。从HepG2细胞提取总RNA，以逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术扩增获得该新基因的全长序列，并测序证实，命名为NS5ATP9，在GenBank中注册，注册号为AF529370。结果 Ns5ATP9基因的编码序列全长为336个核苷酸(nt)，编码产物由111个氨基酸残基(aa)组成，并成功的克隆化。结论 HCVNS5A反式激活新型靶基因NS5ATP9的筛选与克隆，为进一步研究HcvNs5A反式激活作用的分子生物学机制开辟了新的研究方向。
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒 非结构蛋白NS5A 反式激活 NS5ATP9 基因克隆化 分子生物学机制 |
| 修稿时间： | 2003-04-14 |
Cloning and identification of human gene 9 transactivated by nostructural protein 5A of hepatitis C virus |
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| Li Qiang,Liang Yaodong,Cheng Jun,et al Gene Therapy Research Center. Cloning and identification of human gene 9 transactivated by nostructural protein 5A of hepatitis C virus[J]. Chinese Journal of Gastroenterology and Hepatology, 2003, 12(3): 254-256 |
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| Authors: | Li Qiang Liang Yaodong Cheng Jun et al Gene Therapy Research Center |
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| Affiliation: | Li Qiang,Liang Yaodong,Cheng Jun,et al Gene Therapy Research Center,Institute of Infectious Diseases,The 302 Hospital of PLA,Beijing 100039,China |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | NS5A protein Hepatitis C virus Transactivation Gene cloning |
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