| 人胰岛素样生长因子1真核细胞表达质粒的构建及其稳定表达细胞株的建立 |
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| 引用本文： | 付长峰,刘一,张绍坤,付土波.人胰岛素样生长因子1真核细胞表达质粒的构建及其稳定表达细胞株的建立[J].中国临床康复,2005,9(47):49-51. |
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| 作者姓名： | 付长峰 刘一 张绍坤 付土波 |
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| 作者单位： | [1]吉林大学第一医院骨科,吉林省长春市130021 [2]吉林大学公共卫生学院,卫生部放射生物重点实验室,吉林省长春市130021 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（30400447） |
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| 摘 要： | 目的：构建胰岛索样生长因子1（insulin growth faetor 1，IGF-1）的真核细胞表达质粒，转染神经胶质瘤细胞（C6细胞），建五hIGF-1稳定表达细胞株，为进一步观察胰岛索样生长因子1基因体内转染后对脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响打下基础。方法：实验于2004-05／09在吉林大学公共卫生学院放射生物实验室进行，用聚合酶链反应方法从人的肝细胞cDNA文库中克隆出IGF—1cDNA，然后定向插入真核细胞表达载体pcDNA3.1中，酶切电泳和基因测序鉴定插入质粒的hIGF-1基因序列；使用C6细胞株，用脂质体方法转染C6细胞。经G418筛选，形成阳性细胞克隆。继续培养4周，进行Western blot检测。结果：重组的真核细胞表达质粒pcDNA3．1-hIGF-1所含的IGF-1cDNA序列和插入方向均正确。Western blot检测结果证实转染的hIGF-1基因在C6细胞内成功表达。结论：实验所构建的重组真核细胞表达载体pcDNA3．1-hIGF-1能够稳定表达有活性的hIGF-1，实验结果对进一步观察脊髓损伤后胰岛素样生长因子1抑制神经细胞凋亡的作用有一定意义。
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| 关 键 词： | 脊髓损伤 细胞凋亡 胰岛素样生长因子1 转染 |
| 文章编号： | 1671-5926（2005）47-0049-03 |
| 收稿时间： | 2005-11-07 |
| 修稿时间： | 2005-11-23 |
Construction of eukaryotic expression plasmid for human insulin-like growth factor and the establishment of its stable expression in cell strain |
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| Fu Chang-feng, Liu Yi, Zhang Shao-kun, Fu Shi-bo,.Construction of eukaryotic expression plasmid for human insulin-like growth factor and the establishment of its stable expression in cell strain[J].Chinese Journal of Clinical Rehabilitation,2005,9(47):49-51. |
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| Authors: | Fu Chang-feng Liu Yi Zhang Shao-kun Fu Shi-bo |
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