降钙素基因相关肽诱导前软骨干细胞成骨分化的实验研究

目的 探讨降钙素基因相关肽（CGRP）体外定向诱导前软骨干细胞(PSCs)向成骨细胞分化的作用及其机制。 方法 将分离培养的大鼠乳鼠PSCs分别置于含有不同浓度(包括0，1×10-8mol/L，1×10-9mol/L，1×10-10mol/L)CGRP的DMEM/F12培养液中培养，观察细胞形态学变化。于细胞培养后不同时间点采用CCK-8检测细胞增殖情况；再将细胞随机分为实验组及对照组，实验组置于含有CGRP（1×10-9mol/L）的成骨培养基中培养，对照组则置于不含CGRP的成骨培养基中培养。对各组细胞进行茜素红染色并检测碱性磷酸酶（ALP）含量；采用RT-PCR法检测各组细胞成骨相关基因［如Runt相关基因转录因子2（RUNX2）、骨桥蛋白(OPN)及骨钙蛋白（BGP）等］表达；采用Western blot法检测β-catenin蛋白表达以评估CGRP对Wnt/β-catenin通路激活的影响。 结果 与对照组(其培养基中无CGRP)比较，CGRP在体外能显著促进PSCs细胞ALP含量增加，矿化结节增大、增多，显著上调RUNX2、OPN、BGP等成骨相关基因及蛋白β-catenin表达，但对PSCs增殖无明显影响。 结论 CGRP可能通过激活Wnt/β-catenin通路促进PSCs向成骨细胞方向分化。