感觉神经肽P物质激活Wnt通路促进间充质干细胞增殖的实验研究

目的 探讨感觉神经肽P物质(SP)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖的影响并初步揭示其中可能的机制。 方法 体外培养SD大鼠BMSCs,CCK-8法检测不同浓度SP刺激下的BMSCs增殖活性。采用荧光实时定量PCR(RT-qPCR)检测不同浓度SP刺激下Wnt通路相关基因(β-catenin, c-myc, cyclin D)的表达情况。在10-8 M 的SP刺激下,采用荧光实时定量PCR检测第1,3,5,7天Wnt/β-catenin通路相关基因(β-catenin, c-myc, cyclin D)的表达情况。另外,SP组单纯添加10-8 M 的SP,SP LiCl组在SP组基础上添加6mM LiCl,SP Dkk-1组在SP组基础上添加10nM Dkk-1,以添加等量PBS为空白对照。 结果 CCK-8法显示SP促进BMSCs增殖明显,其中以10-8 M 的SP作用最为显著。RT-qPCR结果显示SP刺激下,β-catenin, c-myc, cyclin D mRNA表达有显著差异,10-8 M 的浓度差异最为显著,并且呈明显是时间依赖,第5天mRNA表达出现顶峰。并且SP LiCl组β-catenin, c-myc, cyclin D的mRNA和蛋白水平显著增强,而SP Dkk-1组明显抑制。 结论 SP通过激活Wnt/β-catenin通路而显著促进BMSCs增殖。

Neuropeptide SP activates the WNT signal pathway and enhances the proliferation of bone marrow mesenchymal stem cells.