TGF-茁1诱导胃癌细胞上皮间质转化与CD133表达研究 |
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引用本文: | 钟志凤,杜金林,王建平,金晰函,戴剑.TGF-茁1诱导胃癌细胞上皮间质转化与CD133表达研究[J].浙江医学,2016,38(15):1241-1245. |
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作者姓名: | 钟志凤 杜金林 王建平 金晰函 戴剑 |
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作者单位: | 金华市中心医院结直肠肛门外科 |
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摘 要: | 目的研究转化生长因子-茁1(TGF-茁1)促进胃癌侵袭能力,诱导胃癌MKN-45细胞发生上皮间质转化(EMT)的机制及其与PI3K/Akt信号通路调控肿瘤起始细胞标志物CD133表达的关系。方法设空白对照,应用TGF-茁1处理MKN-45细胞(TGF-茁1处理组),观察其对细胞形态学的影响;Transwell检测细胞侵袭能力的改变;RT-PCR及Westernblot检测细胞EMT相关因子Snail、E-cadherin、N-cadherin、p-Akt及CD133的表达水平;PI3K特异性抑制剂LY294002预处理后再应用TGF-茁1处理细胞(TGF-茁1+LY294002处理组),检测p-Akt与CD133表达水平的变化;免疫磁珠分选CD133+与CD133-亚群细胞,检测CD133+组与CD133-组细胞EMT相关因子的表达差异。结果TGF-茁1处理72h后,TGF-茁1处理组细胞由上皮形态转化为间质形态。TGF-茁1处理组Snail、N-cadherinmRNA、蛋白表达水平均高于对照组(均P<0.05);而E-cadherinmRNA、蛋白表达水平均低于对照组(均P<0.05);Transwell检测发现TGF-茁1处理组穿膜细胞数高于对照组(P<0.05);TGF-茁1处理组p-Akt蛋白与CD133mRNA、蛋白表达水平均高于对照组(均P<0.05);TGF-茁1+LY294002处理组p-Akt蛋白与CD133mRNA、蛋白表达水平均低于TGF-茁1处理组(均P<0.05)。CD133+组Snail、N-cadherinmRNA、蛋白表达水平均高于CD133-组(均P<0.05),而E-cadherinmRNA、蛋白表达水平均低于CD133-组(均P<0.05)。结论TGF-茁1诱导胃癌细胞发生EMT,并通过PI3K/Akt信号通路调控CD133表达从而增强胃癌MKN-45细胞的侵袭能力。
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关 键 词: | TGF-茁1 胃 新生物 / 癌 MKN-45 上皮间质转化 CD133 PI3K/Akt |
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