重组腺病毒转染大鼠骨髓间质干细胞的研究

目的：观察腺病毒载体转染骨髓间质干细胞(BMSCs)的有效性和外源性基因表达的时相性。方法:体外培养大鼠骨髓间质干细胞,用已构建好的Ad5-CMV-GFP真核载体分别转染培养的第3代（P3）及第8代（P8）BMSCs。流式细胞仪检测转染后第2、4、7及10d绿色荧光蛋白（GFP）的表达率。RT-PCR、Western杂交等方法检测腺病毒受体（CAR）在各代BMSCs中的基因和蛋白质的表达。结果:重组腺病毒对BMSCs的转染率可达80%,P3与P8代BMSCs转染率无明显差异（P>0.05）。转染后2d可见GPF表达,第7d表达达高峰,28d仍可见GFP在BMSCs中表达。CAR在P1明显低于P2、P3、P6、P8各代BMSCs（P0.05）。结论:重组腺病毒载体能有效转染骨髓间质干细胞,并维持1个月左右。P3与P8BMSCs均可作为基因治疗的高效分子载体。