PAX9基因在肺鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨PAX9基因在肺鳞状细胞癌(LUSC)中的表达情况及其临床意义。方法从TCGA数据库和GEO数据库中获取LUSC患者的基因测序数据和预后数据,包括TCGA-LUSC数据集、GSE21933数据集和GSE73403数据集;选取34例LUSC患者的癌组织及癌旁组织。基于TCGA-LUSC数据集和GSE21933数据集绘制ROC曲线,评估PAX9诊断LUSC的效能;建立基于TCGA-LUSC数据集和GSE73403数据集的LUSC患者预后列线图模型,并采用Kaplan-Meier法分析不同PAX9表达水平LUSC患者的总体生存率;采用qRT-PCR检测比较LUSC患者癌组织与癌旁组织的PAX9基因表达水平;采用qRT-PCR、蛋白免疫印迹试验(Western Blot)检测比较PAX9在人肺鳞状细胞癌细胞(NCI-H520)和正常肺泡上皮细胞(BEAS-2B)中的相对表达情况。用siRNA实现PAX9的敲低,并通过CCK8试验、划痕试验、平板克隆试验以及细胞周期试验分析PAX9的下调对LUSC细胞活力、迁移、扩增以及细胞周期的影响。结果基于TCGA-LUSC数据集和GSE21933数据集,绘制ROC曲线的分析结果显示,根据PAX9基因表达水平诊断LUSC的效能良好;生存分析结果显示,PAX9低表达LUSC患者的总体生存率显著低于PAX9高表达的LUSC患者(P0.05)。LUSC患者癌组织PAX9基因表达水平显著低于癌旁组织;NCI-H520 PAX9基因和蛋白的表达水平均显著低于BEAS-2B。PAX9基因敲除试验结果显示,si-PAX9转染组的NCI-H520细胞活力显著高于si-NC转染组,克隆数显著多于si-NC转染组,愈合速度显著快于si-NC转染组;与si-NC转染组比较,si-PAX9转染组NCI-H520细胞处于S期的细胞明显减少,处于G2期的细胞明显增加。结论 PAX9在LUSC中的表达水平可作为LUSC患者诊断和预后的评估指标;敲除PAX9基因会显著影响LUSC细胞的增殖、克隆、迁移和细胞周期进程。