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白木香AsERF1基因的克隆、亚细胞定位与表达分析
作者姓名:李铁铮  郑一哲  戎玉清  魏胜利  王晓晖  屠鹏飞
作者单位:1. 北京中医药大学中药学院中药现代研究中心;2. 北京中医药大学中药学院中药资源与鉴定系
摘    要:
乙烯响应因子(ethylene-response factor, ERF)是AP2/ERF家族中的亚家族,在植物信号转导、生长发育和植物防御反应中起到重要作用。本研究以白木香(Aquilaria sinensis)为材料,设计特异性引物,克隆了白木香的AsERF1基因的cDNA序列,并进行氨基酸序列分析、原核表达和纯化、亚细胞定位、组织特异性分析、非生物胁迫诱导表达分析研究。白木香AsERF1基因的开放阅读框(ORF)长691 bp,编码229个氨基酸,其蛋白分子质量为25.36 kD。AsERF1蛋白含有1个保守的AP2区域,系统进化树分析表明AsERF1与毛果杨的ERF2蛋白亲缘性最高。利用本生烟瞬时表达系统研究表明AsERF1主要定位于植物细胞核中。构建原核表达载体pET28a-AsERF1,并在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达AsERF1重组蛋白,纯化得到可溶性重组蛋白。实时荧光定量PCR结果显示AsERF1在叶中的表达量最高,茎次之,根和茎尖最低。盐、干旱、低温和重金属胁迫能够诱导AsERF1的表达,其中干旱胁迫对AsERF1的表达水平影响最显著。本研究为揭示ERF基...

关 键 词:白木香  乙烯响应因子  原核表达  亚细胞定位  表达分析
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