| 包装菌株XL-pⅢ的构建及缺陷型辅助噬菌体的制备 |
| |
| 引用本文： | 高荣凯,王芃,王琰.包装菌株XL-pⅢ的构建及缺陷型辅助噬菌体的制备[J].解放军医学杂志,2008,33(4):470-472. |
| |
| 作者姓名： | 高荣凯 王芃 王琰 |
| |
| 作者单位： | 1. 海军总医院中心实验室,北京,100037
2. 军事医学科学院生物工程研究所 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助课题(30200156) |
| |
| 摘 要： | 目的构建能用来制备基因Ⅲ缺失的辅助噬菌体的包装菌株。方法采用重叠延伸PCR方法将完整的噬菌体基因Ⅲ和氯霉素抗性基因体外拼接起来,利用λRed重组系统将其整合到E.coliXL1-Blue染色体上的组氨酸操纵元位点构建包装菌株,用氯霉素抗性进行筛选,并用PCR及组氨酸表型鉴定;用PCR法构建功能基因Ⅲ缺失的噬菌体基因组,将其转化到包装菌株中培养制备辅助噬菌体,以集落形成来测定滴度。结果重组菌株能在氯霉素抗性平板上生长,PCR扩增可得到目的片段,组氨酸表型缺失,说明靶基因定向重组到了细菌染色体的靶位点,将重组包装菌株命名为XL-pⅢ,以其制备的缺陷噬菌体滴度可达到3.7×108,只具备一次感染力。结论成功构建包装菌株,并能制备辅助噬菌体,有望用于选择感染性噬菌体(SIP)体系。
|
| 关 键 词： | DNA 重组 噬菌体 |
| 修稿时间： | 2007年11月28 |
Construction of a packaged strain XL-pⅢ and preparation of defective helper phage |
| |
| Gao Rongkai,Wang Peng,Wang Yan.Construction of a packaged strain XL-pⅢ and preparation of defective helper phage[J].Medical Journal of Chinese People's Liberation Army,2008,33(4):470-472. |
| |
| Authors: | Gao Rongkai Wang Peng Wang Yan |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | DNA recombinant phages |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
