| TNF-α/放线菌素D诱导原代培养内皮细胞凋亡模型的建立 |
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| 引用本文： | 林立,王红,王燕,王炎,陆再英,汪道文. TNF-α/放线菌素D诱导原代培养内皮细胞凋亡模型的建立[J]. 中国分子心脏病学杂志, 2006, 6(6): 332-337,F0003 |
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| 作者姓名： | 林立 王红 王燕 王炎 陆再英 汪道文 |
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| 作者单位： | 430030,武汉市,华中科技大学同济医学院附属同济医院心内科 |
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| 摘 要： | 目的建立RNA合成抑制剂——放线菌素D(actinomycin D,act D)作用下,TNF-α诱导原代培养内皮细胞凋亡的模型,并探讨其作用机制。方法在原代培养3～4代以内的牛主动脉内皮细胞中,加入一定浓度TNF-α/act D作用一定时间。采用MTT细胞活性检测确定最适TNF-α/act D作用浓度和时间。通过DNA ladder分析、流式细胞仪分析、丫啶橙/溴化乙啶染色等方法检测内皮细胞凋亡,用Western blot检测Bcl-2表达、MAPK(ERK1/2)激活水平,以p-NA为底物检测caspase-3活性。结果在一定浓度增敏剂放线菌素D作用下,TNF-α呈浓度依赖性降低细胞活性,促使部分内皮细胞核浓聚、碎裂,导致DNA ladder形成。流式细胞仪分析进一步证明TNF-α/act D增加内皮细胞凋亡比例,并且使内皮细胞中caspase-3活性增加,Bcl-2的表达水平呈时间依赖性的降低以及MAPK (ERK1/2)失活。结论本研究建立了放线菌素D作用下TNF-α诱导原代培养内皮细胞凋亡的模型,并初步探讨其机制,为进一步研究动脉粥样硬化、血管生成等内皮细胞凋亡相关疾病的发病机制提供一定的实验基础。
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| 关 键 词： | TNF-α 凋亡 内皮细胞 MAPK |
| 收稿时间： | 2006-08-14 |
| 修稿时间： | 2006-08-14 |
Primary Cultured Endothelial Cells Apoptosis Induced by TNF-α in the Presence of Actinomycin D |
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| LIN Li,WANG Hong,WANG Yan,WANG Yan,LU Zai-ying,WANG Dao-wen. Primary Cultured Endothelial Cells Apoptosis Induced by TNF-α in the Presence of Actinomycin D[J]. Molecular Cardiology of China, 2006, 6(6): 332-337,F0003 |
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| Authors: | LIN Li WANG Hong WANG Yan WANG Yan LU Zai-ying WANG Dao-wen |
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| Affiliation: | Cardiology Division, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Hnazhong University of Science and Technology, Wuhan, 430030, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | MAPK |
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