| 摘 要： | 目的探讨枇杷叶提取物对脂多糖( LPS)诱导的人 Ⅱ型肺泡上皮细胞 A549增殖、凋亡及氧化应激的影响及其可能作用机制。方法 2019年 6月至 2020年 7月,采用 LPS诱导的 A549细胞建立肺损伤模型( LPS组)同时将正常培养的细胞作为对照组。不同剂量( 1 mg/L、2 mg/L、4 mg/L)的枇杷叶提取物处理细胞( LPS+枇杷叶 -L组、 LPS+枇,杷叶 -M组、 LPS+枇杷叶 -H组),添加磷脂酰肌醇 3激酶( PI3K)/蛋白激酶 B(Akt)信号通路抑制剂 LY294002与枇杷叶提取物处理细胞( LPS+枇杷叶 -H+ LY294002组);采用 MTT法检测细胞增殖;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用 2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(LDH)的含量;采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)的含量;采用硫代巴比妥酸法检测丙二醛的含量;蛋白质印迹法( Western blotting)检测磷酸化磷脂酰肌醇 -3-激酶( p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶 B(p-Akt)、 B细胞淋巴瘤 -2(Bcl-2)、 Bcl-2相关 X(Bax)蛋白蛋白表达量。结果与对照组比较, LPS组吸光度［( 1.38±0.06)比( 0.55±0.02)］及 SOD的含量［( 81.66±5.36)U/L比(14.65±1.06)U/L］降低,凋亡率［(6.41±0.25)%比( 27.43±1.00)%］、 Bax蛋白水平及 LDH［(242.86±6.09)U/L比( 875.92±15.01)U/ L］、丙二醛［( 121.55±3.17)μmol/g比( 424.46±6.48)μmol/g］的含量升高, Bcl-2、p-PI3K［( 0.60±0.04)比( 0.13±0.01)］、 p-Akt［( 0.51±0.04)比( 0.09±0.01)］蛋白水平降低,差异有统计学意义( P<0.05);与 LPS组比较, LPS+枇杷叶 -M组、 LPS+枇杷叶 -H组吸光度［( 0.55±0.02)比( 0.86±0.03)、(1.18±0.05)］及 SOD［( 14.65±1.06)U/L比( 36.84±2.08)U/L、(70.97±3.03)U/L］的含量升高,凋亡率［( 27.43±1.00)%比( 22.24±0.81)%、(14.78±0.49)%］、 Bax蛋白水平及 LDH［( 875.92±15.01)U/L比( 641.95±9.81)U/L、(365.47±7.02)U/L］、丙二醛［( 424.46±6.48)μmol/g比( 277.94±6.90)μmol/g、(156.30±3.26)μmol/g］的含量降低, Bcl-2、p-PI3K［( 0.13±0.01)比( 0.32±0.01)、(0.54±0.03)］、 p-Akt［( 0.09±0.01)比( 0.25±0.02)、(0.42±0.03)］蛋白水平升高,均差异有统计学意义( P<0.05);添加 LY294002可明显逆转枇杷叶提取物对 LPS诱导的 A549细胞增殖、凋亡及氧化应激的作用。结论枇杷叶提取物可通过激活 PI3K/Akt信号通路减轻 LPS诱导的 A549细胞增殖抑制、凋亡和氧化应激效应,为探究枇杷叶治疗细菌感染
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