| 原癌基因USP22启动子的克隆及转录活性分析 |
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| 引用本文： | 熊建军,周英妹,干丽君,龚帧,林玲.原癌基因USP22启动子的克隆及转录活性分析[J].中国医科大学学报,2011,40(7):580-583. |
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| 作者姓名： | 熊建军 周英妹 干丽君 龚帧 林玲 |
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| 作者单位： | 1. 九江学院基础医学院药理教研室,江西九江332000;江西省高等学校系统生物学临床应用重点实验室,江西九江332000
2. 九江学院基础医学院药理教研室,江西九江,332000 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31000581); 江西省科技支撑计划资助项目(2010BSA14000); 江西省自然科学基金资助项目(2010GQY0199) |
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| 摘 要： | 目的克隆原癌基因USP22部分启动子序列，探讨其转录活性。方法应用cDNA 5忆末端快速扩增（5'RACE）方法定位
USP22基因转录起始点；在此基础上针对其5'端非编码区处包括转录起始点在内的-2 828~+52片段进行PCR扩增，产物克隆
入荧光素酶表达载体pGL3-Basic。重组质粒与内参质粒pRL-TK共转染HepG2 与Hela 细胞，双荧光素酶活性检测确定其转录
活性。结果成功确定USP22基因转录起始位点，酶切及测序结果证实USP22基因5'端非编码区2 880 bp 序列正确插入到荧
光素酶报告基因载体pGL3-Basic。重组质粒pGL3-USP22 promoter 转染HepG2 细胞和Hela 细胞后，检测到荧光素酶的高表达
（ P<0.05）。结论成功构建具有转录活性的USP22启动子片段，为进一步研究USP22表达调控机制奠定基础。
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| 关 键 词： | USP22基因 启动子 报告基因 |
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