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| 人外周血内皮祖细胞培养方法的建立 | |
| 引用本文： | 李琴山,刘洋,李艳菊. 人外周血内皮祖细胞培养方法的建立[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2011, 15(46). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.46.025 |
| 作者姓名： | 李琴山 刘洋 李艳菊 |
| 作者单位： | 1. 遵义医学院,贵州省遵义市,563003 2. 贵阳医学院附属医院,贵州省贵阳市,550004 |
| 摘 要： | 背景:成人外周血来源丰富,但内皮祖细胞含量较少,为使其能够更好的应用于组织工程及细胞治疗,有必要建立外周血内皮祖细胞成熟、稳定的体外扩增体系.目的:建立稳定的人外周血分离、培养和体外扩增血管内皮祖细胞的方法.方法:应用密度梯度离心法,获取外周血单个核细胞,将分选后细胞接种于预先包埋了人纤维连接蛋白的培养板上,加入内皮祖细胞专用培养基中培养3d 后,洗掉非贴壁细胞,培养至第6 天,收集贴壁细胞,应用倒置显微镜和苏木精-伊红染色进行细胞形态学观察;采用MTT 法和细胞计数测定第1,3 代细胞生长曲线;应用流式细胞仪测定祖细胞和内皮细胞系标志,对培养的细胞进行鉴定.结果与结论:细胞生长曲线测定表明接种后第3 天细胞进入指数增生期,至第6 天进入平台期,随着传代次数的增加,细胞增殖速度变慢,同时表达干细胞表面标志CD34、CD133 和内皮细胞表面标志血管性血友病因子、血管内皮生长因子受体2.证明人外周血可以分离培养内皮祖细胞. |
| 关 键 词： | 内皮祖细胞 细胞培养 外周血 表面抗原 流式细胞仪 |
Cultivation of endothelial progenitor cells from human peripheral blood |
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| Li Qin-shan,Liu Yang,Li Yan-ju. Cultivation of endothelial progenitor cells from human peripheral blood[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2011, 15(46). DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.46.025 | |
| Authors: | Li Qin-shan Liu Yang Li Yan-ju |
| Affiliation: | Li Qin-shan1,Liu Yang1,Li Yan-ju2 1Zunyi Medical College,Zunyi 563003,Guizhou Province,China,2Affiliated Hospital of Guiyang Medical College,Guiyang 550004 |
| Abstract: | BACKGROUND:Although peripheral blood in adults can provide abundant source of cells,the content of endothelial progenitor cells is low.It is necessary to establish a stable and mature in vitro cultivation system of endothelial progenitor cells in order to achieve a better application in tissue engineering and cell therapy.OBJECTIVE:To establish a stable cultivation system of endothelial progenitor cells from human peripheral blood in vitro,including cell isolation,culture and expansion.METHODS:Mononuclear c... |
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