鲍曼不动杆菌外膜囊泡诱发人单-核巨噬细胞THP-1的炎性反应

目的 建立超速离心法纯化鲍曼不动杆菌外膜囊泡(OMVs),并探讨OMVs诱发人单核-巨噬细胞THP-1炎性反应能力.方法 大量培养鲍曼不动杆菌标准菌株,从培养液上清中以超速离心法提纯OMVs并以透射电镜观察形态.分别以5和50μg/mL的OMVs与THP-1细胞共培养,RT-qPCR检测NOD样受体家族蛋白(NLRP3)和caspase-1表达量;ELISA检测培养液上清中IL-1β含量;蛋白质印迹法检测细胞自噬相关蛋白LC-3Ⅱ和Beclin-1表达量;酶促动力学法检测细胞caspase-3酶活性;流式细胞测量术检测细胞活性氧表达量.结果 成功提纯鲍曼不动杆菌OMVs.OMVs可以诱导THP-1细胞NLRP3炎性复合体活化,并增加自噬相关蛋白LC-3Ⅱ和Beclin-1表达量(P<0.05),以及上调凋亡关键因子caspase-3酶活性(P<0.05).共培养1 h时,OMVs可以显著上调THP-1细胞活性氧表达(P<0.05).结论 鲍曼不动杆菌OMVs可以显著活化巨噬细胞NLRP3炎性复合体.