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SLC7A11基因表达沉默的肝癌细胞株的构建及筛选
引用本文:吴伟刚,田圆,刘琢冰,刘妙娜,刘威龙,杨桂林,陈心春,周伯平.SLC7A11基因表达沉默的肝癌细胞株的构建及筛选[J].现代肿瘤医学,2015,23(2):149-152.
作者姓名:吴伟刚  田圆  刘琢冰  刘妙娜  刘威龙  杨桂林  陈心春  周伯平
作者单位:1. 广东医学院附属深圳市第三人民医院深圳市肝病研究所深圳市感染免疫重点实验室,广东深圳,518112
2. 广东医学院药学院,广东东莞,523808
基金项目:国家自然科学基金面上项目,深圳市科技计划项目
摘    要:目的:构建并筛选出SLC7A11基因表达沉默的肝癌LM3细胞株,为研究SLC7A11基因的表达沉默对肝癌发生发展的影响奠定基础。方法:针对SLC7A11基因的不同部位合成3个siRNA的寡核苷酸片段,分别将其克隆到真核表达载体p GPU6/GFP/Neo中。利用脂质体转染法分别将质粒导入肝癌LM3细胞,24小时后观察细胞内GFP表达情况,并通过real-time PCR及Western blot的方法比较各组细胞SLC7A11基因mRNA和蛋白的表达水平,然后用G418对转染细胞进行筛选培养。结果:经酶切分析及测序验证,成功构建了靶向沉默SLC7A11基因的真核表达质粒p GPU6-SLC7A11-siRNA;通过real-time PCR及Western blot的方法验证,成功筛选出SLC7A11基因表达沉默的肝癌LM3细胞株。结论:成功构建并筛选出SLC7A11基因表达沉默的肝癌细胞株,为进一步研究SLC7A11基因表达沉默对肝癌细胞发生发展的影响奠定了基础。

关 键 词:SLC7A11基因  表达沉默  肝癌细胞  细胞株  构建  筛选

Construction and screening of a hepatoma cell line with silenced SLC7A11
Wu Weigang;Tian Yuan;Liu Zhuobing;Liu Miaona;Liu Weilong;Yang Guilin;Chen Xinchun;Zhou Boping.Construction and screening of a hepatoma cell line with silenced SLC7A11[J].Journal of Modern Oncology,2015,23(2):149-152.
Authors:Wu Weigang;Tian Yuan;Liu Zhuobing;Liu Miaona;Liu Weilong;Yang Guilin;Chen Xinchun;Zhou Boping
Institution:Wu Weigang;Tian Yuan;Liu Zhuobing;Liu Miaona;Liu Weilong;Yang Guilin;Chen Xinchun;Zhou Boping;Key Laboratory of Infection and Immunity,Institute of Hepatology,Shenzhen Third People’s Hospital Affiliated To Guangdong Medical College;School of Pharmacy,Guangdong Medical College;
Abstract:
Keywords:SLC7A11 gene  gene silencing  hepatoma cell  cell line  construct  screen
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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